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1、目的:利用條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)向軟骨細(xì)胞分化,運(yùn)用基因重組技術(shù)將人胰島素樣生長因子-1(IGF-1)基因轉(zhuǎn)染修飾誘導(dǎo)后的人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs),測定IGF-1的表達(dá)情況,再將轉(zhuǎn)染有IGF-1的hMSCs與再生絲素膜復(fù)合培養(yǎng),植入裸鼠體內(nèi)以觀察誘導(dǎo)異位軟骨形成的能力,以基因強(qiáng)化組織工程手段,嘗試新型軟骨組織工程材料,為臨床軟骨修復(fù)提供新的治療方法?! 〗Y(jié)論: 1、梯度離心法能夠獲得hMSCs,體外培養(yǎng)
2、可以增殖且經(jīng)誘導(dǎo)可定向軟骨分化?! ?、可以從人肝組織中擴(kuò)增出人胰島素樣生長因子-1(hIGF-1)基因;成功構(gòu)建了人hIGF-1基因的真核表達(dá)載體系統(tǒng)pSecTag/FRT/V5-His-hIGF-1?! ?、脂質(zhì)體介導(dǎo)hIGF-1基因成功轉(zhuǎn)染經(jīng)誘導(dǎo)的hMSCs,轉(zhuǎn)染的hMSCs能表達(dá)具生物學(xué)活性的hIGF-1蛋白,轉(zhuǎn)染的hMSCs仍然維持軟骨細(xì)胞表型?! ?、轉(zhuǎn)染的hMSCs與再生絲素之間具有良好的生物相容性,hMSCs-hI
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