抗菌新獸藥“菌滅”的活性、毒性及其在兔血漿中的含量測(cè)定研究.pdf

1、喹諾酮類(lèi)是人工合成的抗菌藥物，對(duì)細(xì)菌DNA螺旋酶具有選擇性抑制作用，發(fā)展迅速，其中氟喹諾酮已逐漸成為該類(lèi)藥物的主流，近幾年來(lái)一些新品種不斷問(wèn)世。菌滅是中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所新獸藥研究室研制的一種喹諾酮類(lèi)藥物。該藥物是在氟喹諾酮類(lèi)藥物的母核結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，對(duì)哌嗪基團(tuán)進(jìn)行了取代處理所生成。由于對(duì)取代基的改造，理論上其藥理活性得到加強(qiáng)，其藥代動(dòng)力學(xué)屬性將有所改善。 本研究測(cè)定了菌滅對(duì)金黃色葡萄球菌、豬源葡萄球菌、停乳鏈球菌、乳

2、房炎鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌、雞白痢沙門(mén)氏菌、鼠沙門(mén)氏菌、豬傷寒桿菌、肺炎克雷伯菌、禽巴氏桿菌、綠膿桿菌、李氏桿菌和豬丹毒桿菌等畜禽常見(jiàn)的十幾種病原菌的最小抑菌濃度(MIC)，測(cè)定了菌滅制劑的毒性和眼刺激性，并建立了檢測(cè)兔血漿中菌滅濃度的高效液相色譜法。對(duì)大腸桿菌等病原菌的體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明：菌滅對(duì)革蘭氏陰性菌和陽(yáng)性菌均有非常敏感的抗菌活性，是一種具有廣譜抗菌活性的藥物，菌滅對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、雞白痢沙門(mén)氏菌、

3、鼠沙門(mén)氏菌、禽巴氏桿菌、肺炎克雷伯菌、禽巴氏桿菌、綠膿桿菌等菌株具有比頭孢唑啉鈉更強(qiáng)的抗菌活性，抗菌效果均優(yōu)于頭孢唑啉鈉，但總體上與環(huán)丙沙星相當(dāng)。對(duì)小白鼠進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明：菌滅制劑的半數(shù)致死量為69183.10mg/kg，LD5095％可信限為78180.78～61220.94mg/kg。對(duì)家兔進(jìn)行眼刺激試驗(yàn)結(jié)果表明：對(duì)家兔眼結(jié)膜無(wú)刺激性。應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)，進(jìn)行兔血漿中菌滅濃度的含量測(cè)定方法學(xué)研究。血漿樣品經(jīng)甲醇沉

4、淀蛋白，并用過(guò)濾膜過(guò)濾上清液，以苯甲酰環(huán)丙沙星為內(nèi)標(biāo)，采用色譜儀進(jìn)行分離。色譜柱為ScienhomeKromasilODS-1250mm×4.6mm，5μm；流動(dòng)相為甲醇∶水(60∶40，85％磷酸調(diào)pH=3.0)；流速為1mL/min；柱溫為(30.0±0.5)℃；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為278nm。結(jié)果表明：所得各色譜峰獲得完全分離，內(nèi)源性物質(zhì)峰對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。血漿中菌滅濃度在0.05～100μg/mL范圍內(nèi)，菌滅與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值(S1/S2

5、)與菌滅濃度成良好的線性關(guān)系(y=5.5416x+0.3087，R2=0.9998)。高、中、低三個(gè)濃度的回收率相對(duì)誤差分別為1.3％、5.0％、-9.0％，小于15％，日內(nèi)及日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差均小于10％。通過(guò)體內(nèi)實(shí)際樣品測(cè)定來(lái)檢驗(yàn)已建立的HPLC法，檢測(cè)結(jié)果表明，本法可用于兔血漿中菌滅濃度的檢測(cè)。 結(jié)論：菌滅具有廣譜抗菌活性，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、雞白痢沙門(mén)氏菌、鼠沙門(mén)氏菌、禽巴氏桿菌、肺炎克雷伯菌、綠膿桿菌、李氏桿菌和豬