小麥全蝕病拮抗菌的篩選及其抑菌活性成分的研究.pdf

1、為了獲得針對(duì)小麥全蝕病的優(yōu)質(zhì)生防資源，本研究以全蝕病菌GYY4-4為病原真菌靶標(biāo)，采用平板對(duì)峙法，從155株細(xì)菌中篩選出FY1，KY1，KY2，LDJ11等4株具有明顯抑菌效果的拮抗菌株，他們的拮抗效率分別為:59.0％，53.8％，51.3％，60.9％，選取效果顯著的一株LDJ11作為出發(fā)菌株，對(duì)其進(jìn)行鑒定和抑菌譜測(cè)定，結(jié)果表明該菌株為花域芽孢桿菌(Bacillusvallismortis)，它對(duì)蘋果腐爛病菌（Valsacerate

2、rsperma），棉花紅腐病菌（Fusariummonihforme），辣椒枯萎病菌（Fusariumoxysporum），板栗炭疽病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz)，蘋果褐斑病菌(DiplocarponmaliHaradaetSawamura)，小麥全蝕病菌（G.graminisVar.tritici），小麥紋枯病菌(Rhizoctoruasolani)，小麥赤霉病菌(Fusariumgrami

3、nearum)等多種病原真菌表現(xiàn)出了明顯的拮抗活性，對(duì)小麥全蝕和板栗炭疽病菌的拮抗效果尤為顯著，其拮抗效果分別為60.9％和59.7％,并且在盆栽防效試驗(yàn)中，菌株LDJ11對(duì)小麥全蝕病顯示出了良好的防治效果，其防治效果可達(dá)65.67％。顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，被菌株LDJ11抑制的全蝕病菌菌絲呈現(xiàn)畸形，頂端膨大，并有原生質(zhì)外滲現(xiàn)象。
　　對(duì)菌株LDJ11產(chǎn)生抑菌活性物質(zhì)的培養(yǎng)基及條件進(jìn)行優(yōu)化，確定了發(fā)酵的最佳碳氮源分別為葡萄糖和蛋白胨，

4、300ml三角瓶最佳裝液量為150mL～175mL，初始pH7.0，接種量2％，溫度37℃，轉(zhuǎn)速200r/min培養(yǎng)48h。
　　采用飽和度為50％的硫酸銨沉淀和甲醇抽提相結(jié)合的方法對(duì)發(fā)酵液里的活性物質(zhì)進(jìn)行粗提，對(duì)分離出的活性物質(zhì)進(jìn)行性質(zhì)研究發(fā)現(xiàn)，所得到的活性物質(zhì)具有對(duì)紫外照射，溫度，蛋白酶K，pH穩(wěn)定的特性，并將粗提物經(jīng)HitrapQHP柱和C18柱分別進(jìn)行陰離子交換層析和反相層析，將得到的活性成分通過HLP-MS進(jìn)行檢測(cè)，鑒定