生長分化因子-9及環(huán)氧合酶-1在多囊卵巢綜合征和正常大鼠中的表達(dá).pdf

1、目的：多囊卵巢綜合癥(PCOS)是十分常見的婦科內(nèi)分泌疾病，在我國有著龐大的患病人群。本研究利用PCOS大鼠模型，通過觀察生長分化因子-9(GDF-9)及前列腺素E2的合成限速酶-環(huán)氧合酶-1(COX-1)在多囊卵巢和正常卵巢表達(dá)，研究GDF-9、COX-1在卵泡發(fā)育過程中表達(dá)規(guī)律，探討其在PCOS大鼠和正常大鼠卵巢局部調(diào)節(jié)中的作用，以及其在PCOS卵泡發(fā)育停滯、優(yōu)勢化選擇受阻的原因。 材料與方法：選85日齡左右雌性Spragu

2、e Dawley(SD)大鼠55只，隨機(jī)分成兩組，A組35只，B組20只。A組通過Poretsky法建立PCOS模型為PCOS組，B組為正常對照組。兩組大鼠均于給藥22天后禁食水，次日麻醉，取血，3000r/min離心20分鐘，收集血清樣品，-20℃儲存，采用放攝免疫分析法(RIA)測定血清中睪酮(T)、黃體生成素(LH)及空腹胰島素(FINS)含量，取出雙側(cè)卵巢組織，稱重，并將卵巢組織以其長徑剖開，右側(cè)卵巢組織固定于4％中性福爾馬林中

3、24h后，做成石蠟包塊，應(yīng)用免疫組化法測定GDF-9、COX-1在卵巢中的分布和表達(dá)。左側(cè)卵巢組織-80℃凍存，流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測GDF-9。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：RIA結(jié)果的數(shù)據(jù)用-x±s表示，組間差異用t檢驗(yàn)；免疫組化結(jié)果用x2檢驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)均用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。p<0.05為差別顯著。 結(jié)果： 1.大鼠體重：PCOS組造模后體重顯著高于正常對照組。 2.卵巢大體解剖形態(tài)觀察：PCOS組卵

4、巢體積明顯增大，表面蒼白，可見多個(gè)囊狀擴(kuò)張的卵泡，黃體減少；正常對照組卵巢色澤紅潤，黃體較PCOS組明顯增加。PCOS組卵巢重量顯著高于對照組。 3.卵巢組織學(xué)檢查：PCOS組可以看到早期發(fā)育的較多的原始卵泡和不正常的卵泡(包括閉鎖卵泡)，囊狀擴(kuò)張的卵泡數(shù)量明顯增加，顆粒細(xì)胞層數(shù)減少至2-3層，卵冠丘復(fù)合體消失，黃體數(shù)量明顯下降并伴有不完全的黃素化；正常對照組鏡下見多個(gè)黃體及不同發(fā)育階段的卵泡，卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞呈多層，多為8-9層

5、。 4.血清性激素水平比較:PCOS組血清T、LH、FINS濃度顯著高于正常對照組。 5.GDF-9在PCOS卵巢中的表達(dá)：免疫組化結(jié)果顯示：GDF-9表達(dá)于PCOS組的初級卵泡、次級卵泡及竇狀卵泡的卵母細(xì)胞胞漿中，顆粒細(xì)胞胞漿及卵泡膜細(xì)胞胞漿亦有表達(dá)，與正常對照組表達(dá)相似。GDF-9在PCOS組原始卵泡卵母細(xì)胞胞漿中未見表達(dá)，但在正常對照組有表達(dá)。GDF-9在PCOS組的表達(dá)低于其在正常對照組的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6、GDF-9在PCOS組與正常對照組各階段卵泡的表達(dá)強(qiáng)度相比均呈降低趨勢，在初級卵泡和次級卵泡階段尤為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GDF-9在PCOS組顆粒細(xì)胞表達(dá)低于其在正常對照組的表達(dá)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GDF-9在PCOS組卵泡膜細(xì)胞表達(dá)高于其在正常對照組的表達(dá)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在正常對照組中，GDF-9在卵泡膜細(xì)胞的表達(dá)亦高于其在顆粒細(xì)胞的表達(dá)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GDF-9在兩組間表達(dá)強(qiáng)度相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞技術(shù)檢測PCOS

7、組GDF-9表達(dá)量明顯低于對照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6.COX-1在PCOS卵巢中的表達(dá)：免疫組化結(jié)果顯示：COX-1在卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞內(nèi)均有明顯表達(dá)。在PCOS組，COX-1在卵泡膜細(xì)胞表達(dá)高于其在顆粒細(xì)胞的表達(dá)，兩者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在正常對照組，COX-1在顆粒細(xì)胞的表達(dá)高于其在卵泡膜細(xì)胞的表達(dá)，兩者相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。COX-1在PCOS組卵泡膜細(xì)胞的表達(dá)高于其在正常對照組的表達(dá)，兩者相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，