環(huán)氧合酶-2選擇性抑制劑NS-398對人肝癌BEL-7402和HepG2細胞凋亡及凋亡抑制蛋白表達的影響.pdf

1、原發(fā)性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率為30.3/10萬，占所有癌癥的5％。近二十年來，我國HCC死亡率增加了41.7％，約占全世界HCC死亡人數的45％。外科手術是目前最有效的治療方法，但是超過80％的肝癌病例被確診時已經是晚期，失去了手術機會，而即使對于那些手術患者，其兩年內的復發(fā)率也高達50％。全身性化療是治療肝癌尤其是無手術指征的晚期肝癌的重要方法，但對肝癌的療效

2、尚令人失望。凋亡抵抗是HCC的特征之一，在HCC的發(fā)生發(fā)展中占有重要地位。凋亡抵抗也是肝癌治療失敗的重要原因。最近的研究發(fā)現環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）有明顯的抑制凋亡作用，COX-2在肝癌等多種腫瘤中存在著高表達，其在肝細胞癌發(fā)生過程中起重要作用，COX-2抑制凋亡的作用被認為在HCC化療抵抗中發(fā)揮著重要作用。COX-2選擇性抑制劑可抑制腫瘤細胞增殖、誘導腫瘤細胞凋亡，但其誘導細胞凋亡的詳細機制尚不十分

3、清楚。
　　 目的：探討環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）選擇性抑制劑NS-398對人肝癌BEL-7402、HepG2細胞凋亡及凋亡抑制蛋白survivin、XIAP和c-IAP1表達的影響。
　　 方法：采用MTT法測定COX-2選擇性抑制劑NS-398對BEL-7402、HepG2細胞的增殖抑制情況；原位細胞凋亡檢測法(Terminal deoxynucleotidy transferase

4、-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL)觀察細胞凋亡形態(tài)學變化；流式細胞儀（Flow Cytomtry，FCM）檢測凋亡率；免疫細胞化學技術檢測COX-2，survivin，XIAP和c-IAP1蛋白的表達情況并分析COX-2與survivin，XIAP，c-IAP1表達的相關性。
　　 結果 NS-398可以顯著抑制BEL-7402和HepG2細胞的增殖，并隨著劑量的增加和時間的延長，該抑

5、制作用增強（P＜0.01）；TUNEL染色可見典型的凋亡形態(tài)學特征，包括染色質凝集、邊集化，呈新月形聚集于核膜下；流式細胞儀檢測顯示在G0/Gl期前出現一個代表凋亡細胞的亞G1峰，即凋亡峰，用藥組凋亡率明顯高于對照組，NS-398濃度為0、25、50、100和 200 μmol/L時，BEL-7402凋亡率分別為（1.41±0.23）％、（6.69±0.57）％、（10.96±1.35）％、（22.83±1.84）％和（32.25±2.

6、41）％；HepG2凋亡率分別為（3.3±0.6）％、（5.7±1.8）％、（14.2±1.3）％、（40.1±2.3）％和（64.9±5.8）％（P＜0.01）。免疫細胞化學分析顯示，與對照組相比，NS-398作用后可使COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表達明顯下調（P＜0.01）。相關性分析顯示在肝癌細胞中COX-2與survivin，XIAP，c-IAP1的表達呈顯著正相關（P＜0.01）。