百合離體再生及多倍體誘導(dǎo)的研究.pdf

1、以野生種百合卷丹、渥丹及東方百合雜種系品種索蚌為試材，對(duì)百合離體再生體系進(jìn)行研究，并以秋水仙素為誘變劑，利用浸泡法、組培加倍法對(duì)百合染色體進(jìn)行加倍處理，建立了有效的加倍方法體系，得到卷丹1個(gè)加倍株系、渥丹8個(gè)加倍株系。研究結(jié)果如下： 通過(guò)本試驗(yàn)研究，得到了適合百合外植體消毒、誘導(dǎo)、增殖及生根培養(yǎng)的方法和最佳培養(yǎng)基，建立了百合離體再生體系。卷丹百合鱗片外植體最適宜消毒時(shí)間是70％酒精10s、0.1％HgCl215min，成活率55

2、.6％；卷丹珠芽最適宜消毒時(shí)間是70％酒精10s、0.1％HgCl210min，成活率60.5％；渥丹種子用70％酒精表面消毒30s即可收到較好的效果，成活率高達(dá)95.0％；索蚌鱗片最適合消毒時(shí)間是70％酒精30s、0.1％HgCl215min，成活率最高，60.0％。卷丹百合鱗片、珠芽外植體的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，誘導(dǎo)率86.7％；渥丹種子最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS，種子出芽率37

3、.3％；索蚌最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，誘導(dǎo)率97.5％。卷丹最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，增殖系數(shù)8.0；渥丹最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1增殖系數(shù)5.0，同時(shí)生根5～7條，根長(zhǎng)可達(dá)4.0cm；索蚌最佳增殖培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1，增殖系數(shù)8.0。卷丹最佳生根培養(yǎng)基

4、為1/2MS+IBA0.5mg·L-1，生根率100.0％，平均生根4.5條；索蚌最佳生根培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1，生根率100.0％，生根8～10條。 利用秋水仙素作為誘變劑對(duì)百合多倍體誘導(dǎo)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：采用浸泡法對(duì)百合鱗片、珠芽、種子及無(wú)菌試管苗進(jìn)行處理，雖然處理方法簡(jiǎn)單，易于操作，但成功率低，沒(méi)有獲得成活的加倍株系；組織培養(yǎng)法與秋水仙素加倍處理相結(jié)合可顯著提高加倍成功率。

5、 采用秋水仙素浸泡處理法時(shí)，秋水仙素不同處理濃度、不同處理時(shí)間對(duì)百合外植體的處理效果不同，250mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡渥丹種子72h，胚軸變粗率最高，92.9％，處理后的種子移栽未萌發(fā)。秋水仙素直接浸泡卷丹鱗片和珠芽，再生的小鱗莖未表現(xiàn)出加倍特征，直接浸泡的卷丹珠芽根尖鈍圓，但移栽后全部致死。100mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡渥丹試管苗48h，E值最高，0.467；200mg·L-1秋水仙素溶液直接浸泡索蚌試管苗24h，

6、E值最高，0.466。但繼續(xù)培養(yǎng)二者均未得到成活株系。采用秋水仙素組培法，共處理渥丹種子1116粒，萌發(fā)499粒，用150mg·L-1秋水仙素溶液，處理20d，E值最高，0.51。最后獲得77個(gè)成活株系，36個(gè)株系具有加倍形態(tài)特征。共處理卷丹試管苗450株，適宜的秋水仙素濃度為150mg·L-1，處理20d，形態(tài)變化率最高，37.5％，獲得1個(gè)愈傷組織成苗株系。共處理索蚌試管苗450株，適宜的秋水仙素濃度為250mg·L-1，處理30d