兔肝VX2腫瘤影像病理學(xué)特征其射頻消融后影像病理聯(lián)系.pdf

1、目的：1）通過(guò)開(kāi)腹組織塊種植法建立兔肝VX2腫瘤模型，應(yīng)用常規(guī)CT、MRI技術(shù)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)，探討VX2肝移植瘤的一般生物學(xué)特性及選擇適合射頻消融治療的模型；2）將實(shí)驗(yàn)一所建立的兔肝VX2腫瘤模型，應(yīng)用CT灌注成像及MR彌散成像技術(shù)，并與大體及常規(guī)組織病理學(xué)結(jié)果對(duì)照，探討功能成像與腫瘤增殖及凋亡的關(guān)系；3）通過(guò)實(shí)驗(yàn)一選擇的合適VX2肝移植瘤模型，建立兔肝VX2腫瘤射頻消融術(shù)后完全消融及局部腫瘤進(jìn)展的模型，使用CT增強(qiáng)掃描動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，分

2、析局部腫瘤進(jìn)展發(fā)生部位及模式的特征。
　　 方法：29只新西蘭大白兔，其中2只做荷瘤種兔傳代，27只隨機(jī)分為對(duì)照組9只和實(shí)驗(yàn)組18只。3%戊巴比妥鈉1ml/kg經(jīng)耳緣靜脈全麻，實(shí)驗(yàn)組行開(kāi)腹種植VX2組織塊，對(duì)照組只種植明膠海綿不種植組織塊。開(kāi)腹種植后7、14、21天進(jìn)行CT、MR常規(guī)檢查，及CT灌注和MR彌散加權(quán)成像。觀察肝腫瘤形態(tài)學(xué)特征，并應(yīng)用軟件測(cè)量肝VX2腫瘤體積，應(yīng)用公式計(jì)算VX2肝種植瘤腫瘤體積倍增時(shí)間。檢查完畢后隨機(jī)

3、選取6只實(shí)驗(yàn)組和3只對(duì)照組過(guò)度麻醉法處死動(dòng)物，開(kāi)腹觀察肝臟及腫瘤大體情況，與影像相對(duì)應(yīng)層面選取組織塊，常規(guī)石蠟包埋、切片，HE染色、角蛋白多克隆抗體免疫組化染色、增殖細(xì)胞核抗原染色、TUNEL法原位細(xì)胞凋亡染色，并將病理學(xué)改變與影像學(xué)表現(xiàn)對(duì)照。30只新西蘭大白兔開(kāi)腹肝左內(nèi)葉種植VX2腫瘤，至肝內(nèi)形成直徑約2cm直徑單發(fā)腫塊時(shí)，隨機(jī)分為對(duì)照組即完全消融組9只，實(shí)驗(yàn)組即局部腫瘤進(jìn)展組（LTP組）21只，行CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺單次射頻消融治療。

4、對(duì)照組完全消融腫瘤，同時(shí)消融腫瘤邊緣約10 mm正常肝組織；實(shí)驗(yàn)組消融區(qū)邊緣超過(guò)腫瘤邊緣，但至少有一個(gè)邊緣瘤周肝組織小于5mm。消融術(shù)后分別于射頻后3天、7天、14天進(jìn)行三期增強(qiáng)CT掃描，每次掃描完成后隨機(jī)選擇3只對(duì)照組和7只實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物分別處死。觀察射頻區(qū)形態(tài)特征、局部腫瘤進(jìn)展的模式和部位，CT圖像與大體及鏡下病理對(duì)照。
　　 結(jié)果：開(kāi)腹后至第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)束，27只實(shí)驗(yàn)兔均存活；種植7天時(shí)，6只兔T1WI發(fā)現(xiàn)的3個(gè)VX2瘤灶，T

5、2WI發(fā)現(xiàn)6個(gè)瘤灶，CT增強(qiáng)掃描發(fā)現(xiàn)6個(gè)瘤灶，此時(shí)兔肝VX2瘤類(lèi)圓形，CT平掃平均直徑為（0.57±0.14）cm；種植14天T2WI和T2WI及增強(qiáng)CT均發(fā)現(xiàn)6只兔肝內(nèi)的6個(gè)病灶，此時(shí)VX2肝移植瘤呈類(lèi)圓形，CT平掃平均直徑為（1.48±0.28）cm；種植21天時(shí)，CT、MRI共發(fā)現(xiàn)6只兔肝內(nèi)9個(gè)瘤灶，此時(shí)VX2肝移植瘤外形不規(guī)則、分葉狀，CT平掃平均直徑為（2.28±0.32）cm。種植7天、14天、21天CT測(cè)量腫瘤體積分別為（

6、0.181±0.089）ml、（1.527±0.207）ml和（8.836±1.397）ml，計(jì)算腫瘤體積倍增時(shí)間為（2.6283±0.4202）天。種植7、14、21天時(shí)腫瘤組織PCNA表達(dá)高于瘤周肝組織及正常肝組織（F分別為174.275、121.999和158.785，P＜0.001）；腫瘤組織細(xì)胞凋亡均高于對(duì)照組肝組織（t分別為38.144、19.047和20.655，P＜0.001）。肝VX2瘤灶DWI上ADC值與增殖指數(shù)及凋

7、亡指數(shù)相關(guān)分析表明，增殖指數(shù)與ADC值相關(guān)，Spaemrna相關(guān)系數(shù)r為-0.351，P＜0.05。不同種植時(shí)間瘤肝交界區(qū)BF、BV差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.94，P=0.42和F=3.878，P=0.044）；腫瘤周緣的BF、BV與PCNA表達(dá)相關(guān)，r=0.486，P=0.041和r=0.546，P=0.019。腫瘤的體積倍增時(shí)間與腫瘤周緣PCNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，r=-0.585，P=0.046。30只兔均成功制成單發(fā)VX2肝腫瘤模型，

8、腫瘤平均直徑15.0 mm，其中29只完成射頻治療，4只RFA后死亡，16只伴有腹壁灼傷。實(shí)驗(yàn)組18只兔共發(fā)現(xiàn)LTP病灶25個(gè)，其中外生新月形9個(gè)、外生結(jié)節(jié)型13個(gè)、內(nèi)生新月型2個(gè)、內(nèi)生結(jié)節(jié)型1個(gè)；7只對(duì)照組射頻區(qū)邊緣未見(jiàn)腫瘤細(xì)胞。14只兔的18個(gè)LTP病灶發(fā)生于消融區(qū)邊緣距腫瘤邊緣不足5 mm區(qū)（77.8%，14/18）。25個(gè)LTP中17個(gè)病灶位于射頻針短軸周?chē)?個(gè)病灶發(fā)生于射頻針尖遠(yuǎn)端，6個(gè)病灶位于射頻針近端，射頻針活性電極短軸

9、周?chē)^其他部位更易發(fā)生局部腫瘤進(jìn)展（P=0.011）。
　　 結(jié)論：開(kāi)腹種植法兔肝VX2種植模型方法簡(jiǎn)單、成瘤率高；VX2肝腫瘤生長(zhǎng)迅速，腫瘤體積倍增時(shí)間為（2.6283±0.4202）天，影像學(xué)隨訪時(shí)間以3天為宜。CT灌注成像可以直觀、量化反映VX2肝癌的微循環(huán)血流動(dòng)力學(xué)情況，其中BF、BV在腫瘤不同區(qū)域的量化數(shù)值與腫瘤細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)指數(shù)相關(guān)。MR彌散加權(quán)成像ADC值與腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)。VX2肝移植瘤是腫瘤細(xì)胞過(guò)度增殖