不同熱灸溫度和面積刺激對大鼠延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核神經(jīng)元的激活作用.pdf

1、不同熱灸溫度和面積刺激對大鼠延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核神經(jīng)元的激活作用針灸被用來治療各種疾病包括疼痛，因其具有獨特的療效，引起許多科學家的關(guān)注，并試圖尋找針灸作用機制的充分證據(jù)。灸法學，作為針灸醫(yī)學的重要組成部分，是針灸醫(yī)師治療疾病必須掌握的基本技能。目前，針刺鎮(zhèn)痛和針刺麻醉的原理已進行了廣泛和深入的研究，其中一些基本問題已經(jīng)比較明確，電生理學研究表明針灸穴位能夠抑制因軀體和內(nèi)臟疼痛引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同部位的神經(jīng)元放電活動，為針灸臨床能夠迅速緩

2、解疼痛提供了很好的解釋。相比之下對灸法的研究則非常滯后，其原因主要是治療方法沒有根本改進。從患者角度講，施灸必用火燒，有被灼傷的風險，而且治療時間相對較長。另外還有突出的不足就是人們不清楚施加多大的熱灸面積、多高的施灸溫度才能取得最佳治療效果。直到現(xiàn)在，灸的面積應該有多大、灸的溫度多高最合適?仍然是未解之謎。 本研究采用電生理學方法，首次系統(tǒng)研究熱灸刺激的基本要素和關(guān)鍵科學問題。本項目利用了可對分級強度和分級面積刺激發(fā)生規(guī)律應答

3、反應的延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核(subnucleus reticularis dorsalis，SRD)全身異覺異位會聚神經(jīng)元作為研究的模型，來探討不同面積的熱灸刺激和不同強度溫度對全身異覺異位會聚神經(jīng)元的量．效激活反應，可以得到這種規(guī)律反應的線性曲線；那么，最佳的熱灸刺激參數(shù)也就計算出來了，可以用于指導臨床。 1材料和方法 實驗選用健康成年雄性SD大鼠，體重250～300克，用10％烏拉坦(urethane，1.0～1.5g/

4、kg體重)腹腔注射麻醉。動物體溫通過反饋型加熱儀控制，并維持在36～38℃之間。行氣管插管術(shù)并進行人工呼吸。移至立體定位儀后，在大鼠頭頂和項部實施手術(shù)，暴露菱形窩，SRD神經(jīng)元細胞外記錄的坐標為：延髓背部菱形窩底端閂部(obex)正中為零點，向后1.0～2.0mm，正中線旁開0.5～1.5mm，延髓表面下600～1500μm。對于記錄到的延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核神經(jīng)元，首先記錄30s的神經(jīng)元背景活動，然后隨機選擇不同的刺激面積和刺激溫度的組合，

5、在大鼠腹部中脘穴附近給予熱灸刺激30s，同時記錄SRD神經(jīng)元的反應；刺激結(jié)束，繼續(xù)記錄30s神經(jīng)元的活動；待細胞放電恢復后，再進行下一組合的刺激。為了便于控制刺激參數(shù)，我們選用不同開口直徑的廣口瓶盛裝不同溫度的熱水作為模擬熱灸刺激，我們選定的刺激溫度分別為：40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃，廣口瓶開口的面積分別為：0.785cm<'2>(直徑1.0cm)、1.766cm<'2>(直徑1.5cm)、3.14cm<'2

6、>(直徑2.0cm)、4.906cm<'2>(直徑2.5cm)、7.065cm<'2>(直徑3.0cm)、9.616cm<'2>(直徑3.5cm)、12.56cm<'2>(直徑4.0cm)，不同的刺激參數(shù)組合共有49種。 2結(jié)果2.1相同刺激溫度一不同刺激面積對SRD神經(jīng)元的激活作用當刺激溫度為40℃和42℃時，無論刺激面積多大對SRD神經(jīng)元都沒有激活作用。當刺激溫度在44℃～52℃時，無論刺激面積多大，SRD都會發(fā)生激活反應。

7、 44℃刺激面積的直徑為1.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=9)的放電平均增加0.75±0.2個/秒，增加百分比為61.05±20.68％。刺激直徑為1.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=10)的放電平均增加1.48±0.2個/秒，增加百分比為135.1±33.2％。當刺激直徑為2.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=10)的放電平均增加2.8±0.78個/秒，增加百分比為254.5±66.76％。刺激直徑為2.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=11)的放電平

8、均增加2.86±0.39個/秒，增加百分比為237.27±53.68％。刺激直徑為3.0cm時，SRD神經(jīng)元(11=13)的放電平均增加3.09±0.55個/秒，增加百分比為365.44±105.1％。刺激直徑為3.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=10)的放電平均增加4.84±0.44個/秒，增加百分比為443±83.71％。刺激直徑為4.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=9)的放電平均增加4.86±0.26個/秒，增加百分比為485.56±77

9、.15％。SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激面積在直徑1.0～3.5cm的范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=1.45x-0.62；r=0.95；P<0.01；當刺激面積達到3.5cm后，SRD神經(jīng)元的放電頻率出現(xiàn)平臺，不再隨刺激面積的增加而增加。 46℃刺激面積的直徑為1.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=17)的放電平均增加2.44.±1.08個/秒，增加百分比為184.88±85.18％。刺激直徑為1.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=17)的放電平均增

10、加3.44±1.06個/秒，增加百分比為263.26±113.05％。當刺激直徑為2.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=19)的放電平均增加5.84±1.28個/秒，增加百分比為338.74±89.75％。刺激直徑為2.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=11)的放電平均增加5.97±0.58個/秒，增加百分比為620.73±177.21％。刺激直徑為3.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=18)的放電平均增加7.28±0.64個/秒，增加百分比為445±9

11、1.23％。刺激直徑為3.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=12)的放電平均增加7.7±0.73個/秒，增加百分比為1161.23±490.9％。刺激直徑為4.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=11)的放電平均增加10.12±0.95個/秒，增加百分比為820±282.4％。SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激面積在直徑1.0～4.0cm的范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=2.36x+0.22；r=0.97；P<0.01。 48℃刺激面積的直徑為1.0cm時，SRD神

12、經(jīng)元(n=15)的放電變化平均增加4.19±0.97個/秒，增加百分比為567.4±319.9％。刺激直徑為1.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=18)的放電平均增加5.41±1.01個/秒，增加百分比為746.11 ±222.48％。當刺激直徑為2.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=16)的放電平均增加8.99±1.88個/秒，增加百分比為262.25±153.9％。刺激直徑為2.5cm時，SRD神經(jīng)元(n=11)的放電平均增加10.13±0.7

13、2個/秒，增加百分比為766.55±223.9％。刺激直徑為3.0cm時，SRD神經(jīng)元(n=18)的放電平均增加11.65±0.84個/秒，增加百分比為566.5±102.2％。 2.2相同刺激面積一不同刺激溫度對SRD神經(jīng)元的激活作用刺激面積直徑為1.0cm時，SRD神經(jīng)元的放電頻率隨刺激溫度的升高而增加，SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激溫度在44℃-52℃范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=0.55x-22.73；r=0.95；P<0.02。

14、 刺激面積直徑為1.5cm時，SRD神經(jīng)元的放電頻率隨刺激溫度的升高而增加，SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激溫度在44℃～50℃范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=0.81x-33.90；r=0.98；P<0.02；當溫度達到50℃之后，SRD神經(jīng)元的放電頻率不再隨刺激溫度的升高而增加，反而有減小的趨勢。 SRD神經(jīng)元的放電頻率在刺激面積直徑為2.0cm時，與刺激溫度在44℃～50℃范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=1.41x.59.0；r=0.99

15、；P<0.01；之后放電頻率不再隨溫度的升高而增加。 當刺激面積直徑為2.5cm時，在在44℃～50℃范圍內(nèi)SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激溫度呈線性關(guān)系：y=1.72x-73.04；r=0.99；P<0.01；之后放電頻率不再隨溫度的升高而增加。 當刺激面積直徑為3.0cm時，SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激溫度在44℃～50℃范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=2.03x.86.2；r=0.99；P<0.01；當刺激溫度達到50℃時，SR

16、D神經(jīng)元的放電頻率不再隨溫度的升高而增加，達到一個平臺期。 刺激面積直徑為3.5cm時，SRD神經(jīng)元的放電頻率隨刺激溫度的升高而增加，SRD神經(jīng)元的放電頻率與刺激溫度在44℃～50℃范圍內(nèi)呈線性關(guān)系：y=1.91x-80.01；r=0.98；P<0.03；之后達到一個平臺期。 3結(jié)論 本研究采用電生理學方法，以延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核神經(jīng)元為模型首次系統(tǒng)研究熱灸刺激的基本要素和關(guān)鍵科學問題。結(jié)果表明在傷害性范圍內(nèi)的熱灸刺

17、激可以激活延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核全身異覺異位會聚神經(jīng)元，其傳入纖維為A6類和C類纖維。在一定范圍內(nèi)延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核神經(jīng)元的放電頻率分別與刺激溫度和刺激面積呈線性增加的關(guān)系。因此，熱灸刺激必須達到一定的面積和一定強度的溫度才能起到治療作用，但也并非面積越大越好、溫度越高越好。絕大多數(shù)情況下，當溫度到達50℃時，繼續(xù)升高溫度，熱灸刺激的作用不再增加；當刺激面積到達9.616cm<'2>(直徑3.5cm)時，繼續(xù)增加面積，熱灸刺激的作用不再增加。S