Smad4失活和KrasG12D活化對結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的協(xié)同效應(yīng)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、【目的】
　　 研究Smad4 失活和Kras G12D 活化對結(jié)腸癌CT26細胞肝轉(zhuǎn)移的協(xié)同效應(yīng)。
　　 【方法】
　　 利用RNAi 技術(shù)敲減CT26細胞Smad4的表達，建立穩(wěn)定的CT26-Smad4KD細胞系。用MTT 法檢測Smad4 低表達對CT26細胞增殖的影響。
　　 將CT26細胞，轉(zhuǎn)染了空載體的CT26-Vector細胞以及CT26-Smad4KD細胞分別接種至Balb/c 裸鼠皮下，

2、4周后處死裸鼠，通過測量腫瘤體積的大小，觀察Smad4低表達以后對CT26細胞成瘤能力的影響。劃痕實驗（Wound-Healing Assay）比較Smad4 低表達對CT26細胞遷移能力的影響。
　　 【結(jié)果】
　　 RNAi 技術(shù)能夠穩(wěn)定有效的敲減Smad4的表達，其效率在85％以上。CT26細胞經(jīng)TGF-β處理后增殖速度要慢于未經(jīng)處理的細胞，P＜0.05；經(jīng)TGF-β處理后CT26-Smad4KD細胞增殖要快于其對

3、照組細胞，P＜0.05。Balb/c 裸鼠皮下成瘤實驗證實CT26-Smad4KD細胞形成的腫瘤較對照組小約50％，P＜0.05。劃痕實驗表明在TGF-β作用下CT26細胞的遷移快于未經(jīng)處理的細胞，而CT26-Smad4KD細胞的遷移速率慢于其對照組細胞。
　　 【結(jié)論】
　　 TGF-β能夠抑制CT26細胞的增殖，而Smad4 低表達能夠拮抗這一作用。Smad4 敲減能夠抑制CT26細胞在裸鼠皮下的腫瘤形成。Smad4

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