抗真菌抗生素生產(chǎn)菌的選育及其代謝物組初步研究.pdf

1、為了提高實(shí)驗(yàn)室從土壤中篩選得到的利迪鏈霉菌AS 4.2501生產(chǎn)抗真菌抗生素的能力，并加快其在生產(chǎn)中的應(yīng)用；研究采用常規(guī)誘變方法對(duì)生產(chǎn)菌株進(jìn)行選育，并運(yùn)用氣相色譜和飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC/TOFMS)對(duì)生產(chǎn)菌在2L發(fā)酵罐發(fā)酵過程中的中間代謝物進(jìn)行了初步分析。所得研究結(jié)果如下： 運(yùn)用亞硝酸和紫外線復(fù)合誘變方法并結(jié)合菌株自身產(chǎn)物抗性篩選，以立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)作為生物活性檢驗(yàn)指示菌，得到了一個(gè)高產(chǎn)突

2、變株E9(high-yield mutant E9)，其抗菌活性增加82.6％；高產(chǎn)突變株E9的培養(yǎng)和發(fā)酵時(shí)間明顯縮短，比出發(fā)菌株縮短了約24小時(shí)。傳代研究表明高產(chǎn)突變株E9具有穩(wěn)定的生產(chǎn)能力，在.20℃～121℃的溫度范圍內(nèi)其發(fā)酵液生物活性具有很好的穩(wěn)定性。突變菌株E9所具有的這些特性將有利于節(jié)省原料和降低生產(chǎn)成本。 研究表明在2L發(fā)酵罐發(fā)酵過程中高產(chǎn)突變株E9的發(fā)酵時(shí)間也比原始菌株要快大約24h，高產(chǎn)突變株E9發(fā)酵液中的還原

3、糖明顯小于原始菌株，推測(cè)還原糖可能是該抗真菌抗生素的合成代謝的必須物質(zhì)。進(jìn)一步運(yùn)用飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC/TOFMS)對(duì)高產(chǎn)突變株E9和原始菌株的代謝物組胞內(nèi)代謝物組進(jìn)行了比較分析，結(jié)果顯示在高產(chǎn)菌株和原始菌株的代謝物組研究中共發(fā)現(xiàn)了83個(gè)色譜峰，通過NIST質(zhì)譜庫初步鑒定了23個(gè)物質(zhì)，這些物質(zhì)涵蓋氨基酸、羥基酸、糖類、糖化乙醇、磷酸化化合物、芳香化合物、飽和和不飽和脂肪酸、核酸、固醇類和其他的一些物質(zhì)。原始菌株的中間代謝物明顯比突