血紅蛋白誘導一氧化氮合酶過表達與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義.pdf

1、南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文血紅蛋白誘導一氧化氮合酶過表達與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義HemoglobinInducedNitricOxideSynthaseOverexpressionandNitricOxideProductionContributetoBloodBrainBarrierDisruptionintheRat課題來源：國家自然科學基金(81271314)廣東省教育部產學研結合項目(201

2、28091100154)學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院楊碩陳祚招副教授外科學(神經外科)學術型碩士南方醫(yī)科大學第It盎床學院答辯委員會主席陸永建教授答辯委員會成員全偉教授牟永告教授李方成教授方陸雄教授論文評閱人牟永告教授汪求精教授2013年4月1O日廣州摘要放和蓄積，且釋放的血紅蛋白可能是導致血腦屏障損傷的重要病理介質之一。一氧化氮(Nitricoxide，NO)是體內一種重要的調節(jié)分子，是由一氧化氮合酶(nitri

3、coxidesynthase，NOS)以精氨酸為底物合成的。NOS有三種形式，分別為誘導性一氧化氮合酶(inducibleNOS，iNOS)、內皮型一氧化氮合酶(endothelialNOS，eNOS)和神經元型一氧化氮合酶(neuronalNOS，nNOS)。生理狀態(tài)下，NO在脈管系統(tǒng)和中樞神經系統(tǒng)中發(fā)揮著許多重要作用，包括神經傳遞的調節(jié)、局部血流調節(jié)和參與免疫反應。然而，由NOS合成釋放的過量的NO會產生嚴重的神經毒性作用。在急性高

4、血壓、感染、細菌性腦膜炎和腦缺血中，過量生成的NO會導致BBB結構和功能的破壞。此外，除了NO自身的毒性作用，它的衍生物特別是過氧硝酸鹽可產生更嚴重的損傷作用，包括細胞損傷，興奮性毒性和BBB破壞。目的：本研究通過向大鼠右側尾狀核內注入Hb，檢測不同時間點周圍腦組織血腦屏障通透性、緊密連接蛋白claudin5、occludin、ZO1、JAM1mRNA的表達變化、鐵離子蓄積情況、NOS和NO表達生成變化，探究Hb對血腦屏障結構和功能的影

5、響，并進一步分析NOS和NO在此過程中的作用。實驗方法：1、實驗分組及模型制作SPF級SD成年雄性大鼠230只，體質量為250一3009，隨機分為正常組、Hb組和假手術組，后兩組按照模型完成后觀察時間分為6h、12h、24h、48h、3d和7d共6個亞組。立體定向穿刺大鼠右側尾狀核，注射20lal血紅蛋白溶液(150g／L)，制作Hb大鼠腦內注入模型。假手術組大鼠在相同位置僅作單純穿刺。2、腦組織石蠟切片制作及HE染色大鼠麻醉后，依次使