巨龍竹的胚胎學(xué)及離體器官的脫分化研究.pdf

1、巨龍竹(Dendrocalamussinicus)是禾本科(Bambusoideae)竹亞科(Bambusoideae)牡竹屬(Dendrocalamus)是世界上稈形最大的工業(yè)用材竹種，其稈高可達(dá)30m,直徑20-30cm,具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊的開發(fā)前景。由于巨龍竹結(jié)實(shí)率低，在實(shí)際很難采到種子，因此采用傳統(tǒng)的育苗法，育苗的成活率極低，發(fā)筍率也低，其分布區(qū)狹窄，種源稀少無法滿足種苗的需求。本研究針對(duì)此種現(xiàn)狀，對(duì)巨龍竹的胚胎發(fā)育過程進(jìn)

2、行研究，探討巨龍竹結(jié)實(shí)率低的原因，并采用組織培養(yǎng)手段，對(duì)不同外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，為以后的遺傳育種工作打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 胚胎發(fā)育研究的主要研究結(jié)果如下： (1)巨龍竹的雄蕊發(fā)育正常。從雄蕊原基開始形成到發(fā)育到成熟的花藥，無論是纖維層還是絨氈層，均未見發(fā)育、結(jié)構(gòu)異常，花藥壁的結(jié)構(gòu)發(fā)育是正常的。從孢原細(xì)胞的產(chǎn)生到花粉粒的形成，在各個(gè)發(fā)育階段，也均未見到任何結(jié)構(gòu)出現(xiàn)發(fā)育異常。花藥成熟以后花粉散落出來，并且可以正常萌發(fā)，萌發(fā)速

3、度快，萌發(fā)率也較高，30min后萌發(fā)率可達(dá)92．2％。 (2)巨龍竹的雌蕊發(fā)育正常。從雌蕊原基產(chǎn)生及生長(zhǎng)，子房的生長(zhǎng)，花柱的伸長(zhǎng)。雙層珠被的形成，倒生胚珠的產(chǎn)生，均發(fā)育正常。孢原細(xì)胞的形成，大孢子母細(xì)胞以及四分體的產(chǎn)生，到形成完整的胚囊結(jié)均，未見結(jié)構(gòu)發(fā)育異常。巨龍竹的胚囊具有完整的結(jié)構(gòu)，卵細(xì)胞、助細(xì)胞、中央細(xì)胞以及反足細(xì)胞的結(jié)構(gòu)均正常。 (3)巨龍竹為雌雄異熟，授粉方式為異花授粉，大部分小穗同步開花。巨龍竹的受精正常，并

4、且可以產(chǎn)生正常的胚、胚乳以及種子。在巨龍竹的子房中產(chǎn)生了正常的胚和胚乳。以后胚發(fā)育成正常的種子。因此可以認(rèn)為，在巨龍竹的受精階段并未出現(xiàn)發(fā)育異常?？梢娋摭堉竦慕Y(jié)實(shí)率低亦并不由于巨龍竹的受精出現(xiàn)異常造成的。從卵細(xì)胞受精到發(fā)育成正常的種子，未見任何發(fā)育異常。 通過對(duì)巨龍竹的不同材料進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，認(rèn)為： (1)在種胚、小穗和莖節(jié)誘導(dǎo)愈傷組織難易程度上，．由于種胚具有胚性組織，小穗具有發(fā)達(dá)的居間分生組織和胚性細(xì)胞，因此種胚和

5、小穗較莖節(jié)更容易誘導(dǎo)愈傷組織，而種胚較小穗則更易一些，主要是由于小穗消毒不易。往往容易遭受到藥害或者是被污染導(dǎo)致死亡。而成年竹誘導(dǎo)愈傷組織不容易主要是因?yàn)槌赡甑闹窆?jié)已經(jīng)成熟，脫分化比較困難。種胚與小穗誘導(dǎo)的愈傷組織顏色是鮮嫩乳白色的，而竹節(jié)誘導(dǎo)的愈傷組織顏色發(fā)黃，易褐化死亡。種胚最佳的培養(yǎng)基為：MS+2，4一D3．O+KTl．O+蔗糖25。而小穗的最佳的培養(yǎng)基為：MS+2，4一D2．0+KT0．5+蔗糖25。 (2)巨龍竹成年竹