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1、大網(wǎng)膜乳斑巨噬細(xì)胞表型與不同分期胃癌關(guān)系的研究中文摘要目的:探討大網(wǎng)膜乳斑巨噬細(xì)胞(M巾)表型與不同分期胃癌的關(guān)系。方法:收集2011年3月至2011年12月青島市市立醫(yī)院不同分期胃癌患者大網(wǎng)膜乳斑標(biāo)本50例(其中T卜3期30例、T4期20例)以及正常人大網(wǎng)膜乳斑標(biāo)本10例。采用改良三步培養(yǎng)法及Ficoll密度梯度離心法純化培養(yǎng)巨噬細(xì)胞、倒置顯微鏡及瑞氏染色觀察細(xì)胞形態(tài)、CD68免疫熒光染色鑒定巨噬細(xì)胞、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測CD68
2、/CD206一M巾和CD206M2的表達(dá)情況、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測不同時間點巨噬細(xì)胞IL一10、IL—12的分泌情況。對網(wǎng)膜乳斑巨噬細(xì)胞表型與胃癌病理學(xué)特征進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果:免疫熒光染色大網(wǎng)膜乳斑CD68巨噬細(xì)胞陽性率為699%。流式細(xì)胞術(shù)檢測對照組、T13期組和T4期組大網(wǎng)膜乳斑CD68/CD206一M巾數(shù)量分別為(8295900546)X105個、(7453500546)X105個和(2652503002)105個
3、,三組差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(X2=49186,PO01);對照組及T13期組CD68/CD206一M巾數(shù)量明顯高于T4期組為主(F=3418713、6305821,PO01)。大網(wǎng)膜乳斑CD206M2數(shù)量分別為(0169500242)X105個、(1006801213)X105個和(5914402958)105個,三組差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(x2=49194,PO01)。T4期組CD206M2數(shù)量明顯高于對照組及T13期組(Z=439
4、9、一5942,PO01)。CD68/CD206一M由與CD206M2表達(dá)及胃癌T分期呈明顯負(fù)相關(guān)(r=O586、一0832,PO01),而CD206M2的表達(dá)與胃癌T分期呈明顯正相關(guān)(r=0826,P001)。ELISA檢測對照組、T13期組大網(wǎng)膜乳斑巨噬細(xì)胞不同時間點IL一10的平均分泌量均低于T4期組(均PO05),而IL12平均分泌量均高于T4期組(均P005)。IL一12的分泌和ILIO的分泌及胃癌T分期呈明顯負(fù)相關(guān)(r一01
5、94、一0476,PO01),而ILIO的分泌與胃癌T分期呈明顯正相關(guān)(r=0552,PO01)。在胃癌患者大網(wǎng)膜乳斑中,CD68/CD206一M中、CD206M2的表達(dá)與腫瘤是否侵犯漿Thestudyoftherelationbetweenthephenotypesofmacrophagesinmilkyspotsinhumangreateromentnmandgastriccarcinomaswithdifferentclinica
6、lstagesAbstractObjective:ToexploretherelationbetweenthephenotypesofmacrophagesinmilkyspotsinthegreateromentumandgastriccarcinomaswithdifferentstagesMethods:Specimensofhumangreatomentumofgastriccarcinomaswithdifferentstag
7、es(50casesof30instageT1—3and20instageT4)andnormalpeople(10cases)werecollectedinQingdaomunicipalhospitalfromMarch2011toDecember2011UsingamodifiedthreestepincubationmethodandFicolldensitygradientcentrifugationtoisolateandp
8、urifymacrophagesThecellswereidentifiedbymorphologicalobservationandimmunofluorescencestainingFlowCytometry(FCM)wasusedtodeterminetheexpressionofCD68/CD206‘a(chǎn)ndCD206macrophagesEnzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)Wasusedto
9、determinethesecretionofIL10andIL12indifferenttimepointsAndtherelmionbetweenthephenotypesofmacrophagesinmilkyspotsinthegreateromentumandthepathologicalfeaturesofgastriccarcinomaswasanalyzedResults:Theobtainedcellswereandw
10、ereconfirmedtobeCD68macrophageswithapositiverateof699%byimmunofluorescencestainingByFCMthenumberofCD68/CD206。MQinmilkyspotsingreateromentuminnormalcontrols,T1—3groupandT4groupwere(82959a:00546)105(74535士00546)105(59144士0
11、2958)105,respectivelyThenumberofCD68/CD206‘MQinnormalcontrolsandT13groupwaslargerthanthatininT4group(F=3418713、6305821,P001)Thereweresignificantdifferenceamongthetheregroups(f=49186,POo11ThenumberofCD206M2innormalcontrol
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