肺泡上皮β-腎上腺素能受體活性對Na+通道的影響.pdf

1、肺泡上皮組織在呼吸系統(tǒng)中除氣體交換外還具有維持肺泡內(nèi)液體環(huán)境的重要功能。研究認(rèn)為肺泡內(nèi)液體的清除主要依賴肺泡上皮鈉通道介導(dǎo)的Na+離子轉(zhuǎn)運。目前的臨床上使用β2-腎上腺素能受體激動劑能夠有效地消退肺泡性水腫,但對于β-受體激動劑影響鈉、水轉(zhuǎn)運的細(xì)胞機制方面,仍存有不少疑問有待于探索。
　　 本研究將β-腎上腺素能受體激動劑isoproteremol(異丙腎上腺素)和抑制劑propranolol(普萘洛爾)以及α-腎上腺素能受體抑

2、制劑phentolamine(酚妥拉明),作用于人肺泡腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549和人氣道上皮細(xì)胞系16HBE,利用RT-PCR的方法檢測其β受體以及上皮鈉通道(ENaC)α、β和γ三個亞基mRNA表達(dá)的變化。實驗結(jié)果表明,β-受體激動劑isoproteremol能夠增強肺泡細(xì)胞A549的β受體和ENaC-β和-γ兩個亞基mRNA的表達(dá),且mRNA表達(dá)隨時間逐漸增強,而對氣道細(xì)胞16HBE的ENaC-β和γ-兩個亞基mRNA的表達(dá)則呈現(xiàn)抑制作用。

3、β-受體抑制劑Propranolol可以降低肺泡A549、氣道16HBE細(xì)胞ENaC—β和-γ兩個亞基的表達(dá)。表明β受體激動劑和抑制劑是通過改變β受體的表達(dá)水平對來調(diào)控細(xì)胞ENaC的表達(dá)。α-受體抑制劑Phentolamine對兩個細(xì)胞系的作用與isoproteremol類似,增強A549細(xì)胞的ENaC-β、-γ的表達(dá),而降低16HBE的ENaC—β、-γ的表達(dá)。我們還將A549和16HBE兩個細(xì)胞系在通透濾膜上培養(yǎng),探索膠原涂層、接種

4、密度和培養(yǎng)時間等條件,培養(yǎng)成了緊密的細(xì)胞單層。采用電生理短路電流技術(shù)對A549、16HBE細(xì)胞單層的離子通道轉(zhuǎn)運情況進(jìn)行初步研究。腎上腺素adrenaline能夠引起16HBE細(xì)胞短路電流的上升,Cl-通道激動劑forskolin和ATP也能引起跨上皮電流,證明存在Na+、Cl-通道介導(dǎo)的離子轉(zhuǎn)運。
　　 本文通過研究受體激動劑／抑制劑藥物對肺泡上皮β-受體和Na+通道m(xù)RNA表達(dá)的影響,證明了β受體激動劑和抑制劑能夠通過影響β