Aurora-A在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其對細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響.pdf

1、鄭碩士學(xué)位授予單位代碼!Q壘5里學(xué)號或申請?zhí)朡2Q8壘壘密級金孟堂J論文論文題目：AuroraA在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其對細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響作者姓名：學(xué)科門類：專業(yè)方向：導(dǎo)師姓名、職稱：鐘亞莉醫(yī)學(xué)消化道腫瘤楊觀瑞研究員2005年06月01日鄭卅l大學(xué)2005年碩士畢業(yè)論文AuroraA在食管鱗癌中的表達(dá)及其對細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響體監(jiān)測點失控，細(xì)胞周期繼續(xù)進(jìn)行，最終導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定和異倍體的產(chǎn)生，細(xì)胞向惡性方向轉(zhuǎn)化。細(xì)胞學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在

2、Ratl細(xì)胞中過表達(dá)野生型Aurora—A可以使裸鼠致瘤，提示AuroraA是一個癌基因。目前在乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌等多種腫瘤組織中檢測到AuroraAmRNA及蛋白水平增高。研究者已經(jīng)設(shè)計出針對Aurora激酶的小分子抑制劑，并且在動物實驗中顯示出一定的前景。然而，AuroraA在ESCC中表達(dá)情況和生物學(xué)意義尚未見報道；還不能很好地解釋AuroraA為何能引發(fā)腫瘤以及它在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用。本實驗的目

3、的在于分析AuroraA在ESCC和癌周正常組織中的表達(dá)情況，并進(jìn)一步通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法研究AuroraA對ESCC細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響，以探索其在ESCC發(fā)生發(fā)展中的作用和機制，為ESCC的分子病理診斷、臨床預(yù)后判斷和治療方案選擇帶來新的思路和理論基礎(chǔ)。材料與方法1收集20對ESCC組織和配對癌周正常組織標(biāo)本，提取組織總蛋白，Westernblot法檢測組織中AuroraA的蛋白表達(dá)水平；收集64例ESCC組織以及61例癌周正常組織，

4、免疫組化方法檢測組織中AuroraA的表達(dá)和定位；其中64例ESCC標(biāo)本按分化程度分類，包括14例高分化腫瘤、41例中分化腫瘤、9例低分化腫瘤；按浸潤程度分類包括41例原位癌和23例浸潤性癌。2培養(yǎng)12株ESCC細(xì)胞系，提取細(xì)胞總蛋白，Westernblot檢測12株ESCC細(xì)胞系中AuroraA蛋白的表達(dá)水平。選取基礎(chǔ)表達(dá)水平較低的KYSE30細(xì)胞作為轉(zhuǎn)染對象，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染含AuroraAcDNA全長的重組質(zhì)粒，構(gòu)建AuroraA高表達(dá)細(xì)

5、胞株，觀察Aurora—A高表達(dá)對KYSE30細(xì)胞生長速度、細(xì)胞黏附能力的影響。3細(xì)胞體外移動實驗檢測12株ESCC細(xì)胞體外移動能力，分析細(xì)胞移動能力與AuroraA表達(dá)水平間的關(guān)系；以AuroraA高表達(dá)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株和親本細(xì)胞為對象以觀察AuroraA高表達(dá)對細(xì)胞體外移動能力的影響；選擇AuroraA表達(dá)水平較高的EC9706和Colo680為對象，轉(zhuǎn)染AuroraAsiRNA抑制AuroraA蛋白表達(dá)，檢測其對EC9706細(xì)胞體外移