局部肌肉注射A型肉毒毒素播散情況的研究.pdf

1、研究背景:A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A，BTX-A)是革蘭陽性厭氧產(chǎn)孢肉毒桿菌產(chǎn)生的一種神經(jīng)外毒素，可特異性裂解運動終板中運動神經(jīng)元突觸前膜內(nèi)突觸體相關(guān)蛋白SNAP-25(synaptosomal-associated protein of25-kDa)使得遞質(zhì)囊泡無法與突觸前膜融合，從而抑制神經(jīng)末梢乙酰膽堿的釋放而松弛肌纖維，因而一直被用于眼肌痙攣、面肌痙攣等肌張力障礙性疾病的治療。臨床應(yīng)用也日漸增多。既

2、往普遍認為臨床局部肌肉注射BTX-A，其作用只局限于注射點以及附近的突觸，但近年來有越來越多的證據(jù)提示BTX-A的局部注射后，不僅在注射部位發(fā)揮作用，并且對遠隔的神經(jīng)肌肉接頭也有作用，甚至還能通過逆向軸漿運輸?shù)姆绞竭M入高一級神經(jīng)系統(tǒng)。這一現(xiàn)象打破了人們一直以來教條式的認識?，F(xiàn)今BTX-A的中樞效應(yīng)已被逐步揭示，但對其機制的研究仍然十分匱乏。
　　研究目的:外周肌肉注射BTX-A并檢測BTX-A局部注射后逆向軸漿運輸?shù)街袠械那闆r，以

3、及遠隔對側(cè)神經(jīng)肌肉接頭的播散情況，闡明BTX-A產(chǎn)生中樞效應(yīng)的途徑，將為應(yīng)用BTX-A后出現(xiàn)的中樞效應(yīng)給出合理解釋，從而能為臨床注射BTX-A后可能出現(xiàn)的中樞效應(yīng)提供更多有用的信息。
　　研究方法:
　　1)對成年小鼠的單側(cè)腓腸肌注射，低于臨床應(yīng)用劑量(1U/kg)、臨床應(yīng)用劑量(5U/kg)和小鼠耐受的最大安全劑量(30U/kg)三種不同劑量的BTX-A后，不同時間點通過免疫印跡檢測BTX-A水解底物cleaved SNA

4、P-25(cl.SNAP-25)，分析BTX-A局部肌肉注射后播散并且影響的范圍。BTX-A在動物體內(nèi)的播散和作用特點。
　　2)檢測支配注射肌肉的神經(jīng)和相應(yīng)的高一級運動神經(jīng)元內(nèi)的cl.SNAP-25，從而了解是否真的存在BTX-A逆向軸漿運輸?shù)街袠械默F(xiàn)象。
　　結(jié)果:
　　1)單側(cè)注射三個不同梯度的劑量后，均能在對側(cè)肌肉中發(fā)現(xiàn)cl.SNAP-25的存在。
　　2)單側(cè)注射最大耐受安全劑量后，均不能在支配該肌肉的

5、神經(jīng)以及脊髓運動區(qū)發(fā)現(xiàn)cl.SNAP-25的存在。
　　3)不同注射劑量下，機體對BTX-A削減功能性的SNAP-25進行不同程度的代償。
　　結(jié)論:
　　1)即使是低于臨床應(yīng)用劑量的BTX-A可通過血液循環(huán)達到對側(cè)非注射肌肉，并水解神經(jīng)肌肉接頭內(nèi)的SNAP-25。
　　2)即使是應(yīng)用了小鼠最大耐受安全劑量的BTX-A后，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，仍然不能檢測到cl.SNAP-25，說明其逆向軸漿運輸?shù)默F(xiàn)象極其微弱或并不