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文檔簡(jiǎn)介
1、在干旱、鹽堿等逆境條件下植物體內(nèi)可積累大量的甜菜堿,甜菜堿的積累對(duì)改善滲透調(diào)節(jié)、保護(hù)細(xì)胞膜具有重要作用,因此甜菜堿被認(rèn)為是很有效的滲調(diào)劑之一。膽堿單加氧酶(CMO)是甜菜堿合成途徑中的限速酶,它被認(rèn)為是最有希望的抗逆基因之一。本研究利用根癌農(nóng)桿菌(Agribecteriumtumefaciens)GV3101介導(dǎo)的葉盤轉(zhuǎn)化法,進(jìn)行了膽堿單加氧酶基因的遺傳轉(zhuǎn)化,將從鹽角草(Salicorniaeuropaea)中克隆到CMO基因?qū)氲綗煵?/p>
2、(NictianatabacumL.cv.89),獲得卡那霉素抗性植株。對(duì)卡那抗性株的PCR、Southernblot、RT-PCR等分子檢測(cè)結(jié)果表明CMO基因已整合到煙草基因組中并在轉(zhuǎn)錄水平上得到了表達(dá)。選擇部分PCR陽(yáng)性植株進(jìn)行耐鹽性篩選。在相同鹽脅迫條件下,轉(zhuǎn)基因植株所受到的鹽傷害明顯地較對(duì)照植株輕。對(duì)300mmol/LNaCl脅迫下轉(zhuǎn)CMO基因煙草的相對(duì)電導(dǎo)率、葉綠素含量、甜菜堿含量、SOD酶和POD酶活性以及失水速率的分析結(jié)果
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