盤狀結(jié)構(gòu)域受體在成釉細(xì)胞瘤中的表達(dá)與分布.pdf

1、成釉細(xì)胞瘤(Ameloblastomas,Abs)是最常見的牙源性上皮性腫瘤,約占全部牙源性腫瘤的60%。腫瘤內(nèi)主要含有成釉器樣結(jié)構(gòu),但是無(wú)釉質(zhì)或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內(nèi),常導(dǎo)致頜骨的膨大和面部的變形。雖屬于良性腫瘤,但其具有局部侵襲和易復(fù)發(fā)的生物學(xué)行為,少數(shù)病例發(fā)生惡變后可以導(dǎo)致區(qū)域性淋巴結(jié)、肺等遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移,甚至有發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的零星報(bào)道,因此在治療上通常采取廣泛的外科手術(shù)切除。成釉細(xì)胞瘤大多數(shù)來(lái)源于牙齒正常發(fā)育完成后

2、殘余的牙源性上皮剩余,少部分來(lái)自口腔黏膜上皮基底細(xì)胞、含牙囊腫、始基囊腫和角化囊腫襯里上皮的演變。盤狀結(jié)構(gòu)域受體(Discoidin Domain Receotors,DDPs)是近些年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一類酪氨酸激酶(RTKs),由兩個(gè)成員構(gòu)成,即DDR1和DDR2。DDR1廣泛分布于胚胎和成體的組織中,特別是皮膚,腎臟和腸的上皮中,而且接合型DDR1b在個(gè)體出生后的發(fā)育過程中的含量持續(xù)增加。DDR2局限分布于骨骼肌,心臟和結(jié)締組織中。與大多

3、數(shù)可以被血液或者其它體液中的可溶性配體所激活的RTKs不同,DDRs只能被一種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白即膠原所激活。有研究證實(shí),盤狀結(jié)構(gòu)域受體在一系列惡性腫瘤中存在著表達(dá)上調(diào)的情況,參與了這些腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程,與腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力間存在著密切的關(guān)系。
　　 成釉細(xì)胞瘤是具有局部侵襲性生物學(xué)行為的一種牙源性上皮性腫瘤,并且比較容易復(fù)發(fā)。目前的許多文獻(xiàn)報(bào)道證實(shí)了DDRs的表達(dá)水平與某些腫瘤的侵襲能力存在著正相關(guān)。因此探討DDRs在成釉

4、細(xì)胞瘤中蛋白和mRNA水平上的表達(dá)變化與成釉細(xì)胞瘤上述生物學(xué)行為間到底存在著怎樣的關(guān)聯(lián)性是本實(shí)驗(yàn)研究目的。
　　 材料與方法：
　　 80例成釉細(xì)胞瘤存檔蠟塊均來(lái)自2007年至2010年中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院病理科,診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)WHO2005年最新分類,以牙源性角化囊性瘤(KCOT)、正?？谇火つ?NOM)做對(duì)照,用免疫組織化學(xué)染色SP法觀察DDRs蛋白在ABs中的表達(dá)與分布情況。30例成釉細(xì)胞瘤新鮮手術(shù)標(biāo)本均取自于中

5、國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院外科手術(shù),時(shí)間跨度從2004年至2009年。以KCOT、NOM和牙胚組織做對(duì)照,用Western Blot方法,以β-tublin做內(nèi)參,檢測(cè)DDRs在蛋白的表達(dá)水平;用Real Time-PCR方法,以管家基因β-actin校正,檢測(cè)DDRs在mRNA的表達(dá)水平。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 一、DDRs蛋白免疫組化的檢測(cè)結(jié)果
　　 在ABs中,DDR1表達(dá)于腫瘤上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,部分病例可

6、見細(xì)胞核的陽(yáng)性染色。全部80例ABs樣本中有54例呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。
　　 DDR2在腫瘤上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的表達(dá)呈陽(yáng)性,部分病例可見腫瘤間質(zhì)中成纖維細(xì)胞和炎性細(xì)胞染色陽(yáng)性。全部80例ABs樣本中有50例呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。
　　 二、DDRs蛋白Western Blot的檢測(cè)結(jié)果
　　 DDR2在各樣本中均有表達(dá),在ABs中的表達(dá)水平為1.41±0.36,在NOM中的表達(dá)水平為0.70±0.09,在KCOT中的表達(dá)水平為

7、0.64±0.13。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,DDR2在ABs中的表達(dá)水平顯著高于NOM和KCOT(P＜0.05)。
　　 DDR1蛋白在成釉細(xì)胞瘤中的Western Blot檢測(cè)結(jié)果為陰性。
　　 三、Abs中DDRs基因Real-Time PCR的檢測(cè)結(jié)果
　　 DDR1 mRNA在ABs中的表達(dá)水平相對(duì)于牙胚組織高2.4倍,相對(duì)于正常黏膜組織高3.42倍;DDR2 mRNA在ABs中的表達(dá)水平相對(duì)于牙胚組織高3.08倍