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1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文阿司匹林對(duì)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元缺氧缺糖再灌注損傷保護(hù)作用的研究姓名:謝寶明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師:劉瑞珍20080405山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文取出完整腦組織,鈍性分離大腦皮層,原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞。2取體外培養(yǎng)7天的Wistar大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞經(jīng)鑒定后,隨機(jī)分為3大組:①正常對(duì)照組(contr01);②缺氧缺糖再灌注模型組;③缺氧缺糖加不同濃度阿司匹林組。3每組神經(jīng)細(xì)胞都在倒置相差顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀
2、察其形態(tài)學(xué)變化,神經(jīng)細(xì)胞乳酸脫氫酶(LDH)漏出率和MTT還原劑檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞活性;Calcein染色法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞存活狀態(tài);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞線粒體膜電位(MMP)和雙染法(AnnexinVFITC及PI)檢測(cè)不同組別神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果:1新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞離體培養(yǎng)7天后,神經(jīng)細(xì)胞清晰可見,細(xì)胞貼壁良好,胞體增大,多數(shù)呈錐體狀或多極形,胞體有明顯的折光性,立體感強(qiáng),細(xì)胞膜邊界光滑、清楚,神經(jīng)突起相互聯(lián)絡(luò)成網(wǎng)。用NSE免疫組織
3、化學(xué)染色作分類計(jì)數(shù),神經(jīng)細(xì)胞約占90%~95%。2缺氧缺糖再灌注損傷后,OGD/R模型組的神經(jīng)細(xì)胞線粒體活性和線粒體膜電位水平較對(duì)照組顯著降低,細(xì)胞LDH漏出率和細(xì)胞凋亡及壞死百分率均較對(duì)照組顯著升高。阿司匹林組神經(jīng)細(xì)胞線粒體活性和線粒體膜電位水平均較OGD/R模型組顯著升高,細(xì)胞LDH漏出率和細(xì)胞凋亡及壞死百分率較OGD/R模型組顯著降低,上述幾項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果表明阿司匹林能顯著提高神經(jīng)細(xì)胞線粒體活性和膜電位水平,降低細(xì)胞凋亡及壞死的百分率
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