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文檔簡介
1、目的:研究氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,oxLDL)對EPC存活及功能的影響,oxLDL對EPC的作用是否與內皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)有關及是否由血凝素樣oxLDL受體(lectin-likeoxLDLreceptor,LOX-1)介導。 方法:分離、培養(yǎng)EPC,然后與不同濃度oxLDL(分別為10、25、50μg
2、/mL)、硝基精氨酸甲酯(N-nitro-l-argininemethylester,L-NAME)或triciribine孵育48h,其中,一部分EPC與左旋精氨酸或LOX-1阻斷抗體(LOX-1monoclonalantibody,LOX-1mAb)預處理后,再與50μg/mLoxLDL孵育。然后,檢測EPC凋亡率及遷移、粘附和體外血管形成能力,同時檢測一氧化氮(nitricoxide,NO)的產生,磷酸化Akt、eNOS及LOX-
3、1的蛋白表達,eNOS和LOX-1的mRNA表達。 結果:臍血CD34+細胞培養(yǎng)14d后可形成梭形的貼壁細胞,經證明梭形細胞為EPC。oxLDL劑量為25μg/mL、50μg/mL時,EPC凋亡率明顯增加,遷移、粘附及體外血管形成能力明顯下降。同時,NO的產生量明顯下降。oxLDL的作用能被左旋精氨酸或LOX-1mAb所抑制。L-NAME和triciribine具有與oxLDL相似的作用,同樣誘導EPC凋亡,抑制EPC功能。
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