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文檔簡介
1、背景和目的:中國是世界上食管癌發(fā)病率和死亡率最高的國家,河南省食管癌發(fā)病率和死亡率均居中國首位?;熓鞘彻馨┑闹饕委熓侄沃?多藥耐藥是化療失敗的主要原因。目前已知的抗腫瘤藥物幾乎都能發(fā)生耐藥,因此腫瘤耐藥已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)之一。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶-π(glutathione S-transferase,GST-π),又名胎盤型或酸性同功酶,定位于人染色體11q13,基因結(jié)構(gòu)長度為3kb,其分子量為55KD。GST-π分布廣泛、含量
2、豐富,普遍存在于紅細(xì)胞、肺、乳腺、前列腺、胎盤等正常組織中。GST-π在多種人惡性腫瘤組織中表達(dá)。而腫瘤細(xì)胞通過調(diào)節(jié)谷胱甘肽(GSH)水平,增加GST活性,從而加速化學(xué)藥物代謝而產(chǎn)生耐藥性。其中,GST-π是GST引起耐藥的主要原因,被認(rèn)為是腫瘤的標(biāo)志酶。DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoisomerase,TOPO-Ⅱ)又稱回旋酶(Gyrase),TOPO-Ⅱ有兩種同功酶Ⅱα和Ⅱβ,分子量分別為170KD和180KD,分別定位于人染色體17
3、q21-q22和人染色體3p24。TOPO-Ⅱ的兩種同工酶在腫瘤組織廣泛表達(dá),無明顯組織特異性。其耐藥機(jī)制主要是通過介導(dǎo)DNA的斷裂反應(yīng)并形成DNA-酶復(fù)合物,各種化療藥物通過以上復(fù)合物的穩(wěn)定性而影響癌細(xì)胞的增殖。研究發(fā)現(xiàn),在多種人惡性腫瘤組織中多藥耐藥基因GST-π和TOPO-Ⅱ等有共表達(dá)現(xiàn)象。有關(guān)在食管鱗癌組織中GST-π和TOPO-Ⅱ聯(lián)合表達(dá)的研究尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。為探討GST-π和TOPO-Ⅱ在食管鱗癌中聯(lián)合表達(dá)及其意義,本研究采
4、用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)GST-π和TOPO-Ⅱ在食管鱗癌組織中的蛋白表達(dá),探討GST-π和TOPO-Ⅱ的蛋白表達(dá)及聯(lián)合表達(dá)與食管鱗癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。材料和
方法:1手術(shù)存檔蠟塊:河南省腫瘤醫(yī)院及鄭州大學(xué)一附院2004年9月至2006年11月食管鱗癌手術(shù)切除存檔石蠟包埋組織標(biāo)本48例,患者術(shù)前均未行放療、化療。2采用免疫組化SP法分別對(duì)48例食管鱗癌組織及30例正常黏膜組織中GST-π和TOPO-Ⅱ蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢
5、測(cè)。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。陽性率之間的比較采用X~2檢驗(yàn)(chi-square);兩變量之間的關(guān)系分析采用相關(guān)分析。顯著性水準(zhǔn)α=0.05。
結(jié)果:1.正常食管黏膜組織GST-π蛋白陽性表達(dá)率為30.00%(9/30),食管鱗癌組織中GST-π蛋白陽性表達(dá)率為64.58%(31/48);癌組織GST-π蛋白陽性表達(dá)率與正常食管黏膜組織相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.正常食管黏膜
6、組織TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率為20.00%(6/30),食管鱗癌組織中TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率為41.67%(20/48);癌組織TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率與正常食管黏膜組織相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3.14例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌組織GST-π蛋白陽性表達(dá)率為64.28%(9/14),無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例食管鱗癌組織GST-π蛋白陽性表達(dá)率為64.71%(22/34),兩組間GST-π蛋白陽性表達(dá)率差異無顯著性(P>0
7、.05)。4.14例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌組織TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率為42.86%(6/14),無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例食管鱗癌組織TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率為41.18%(14/34),兩組間TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率差異無顯著性(P>0.05)。5.高分化、中分化和低分化的食管鱗癌組織中GST-π蛋白陽性表達(dá)率分別為73.33%(22/30)、57.14%(8/14)、25.00%(1/4),任一分化程度之間相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(
8、P<0.05)。6.高分化、中分化和低分化的食管鱗癌組織中TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率分別為33.33%(10/30)、50.00%(7/14)、75.00%(3/4),任一分化程度之間相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。7.GST-π與TOPO-Ⅱ蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)相關(guān)性經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示兩者之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.787,P<0.05)。
結(jié)論:1.食管鱗癌組織及正常黏膜組織中GST-π和TOPO-Ⅱ蛋白陽性表達(dá)率均
9、依次降低,癌組織與正常黏膜組織中GST-π和TOPO-Ⅱ的蛋白表達(dá)相比差異有顯著性。表明可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。2.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組食管鱗癌組織中GST-π和TOPO-Ⅱ蛋白的表達(dá)與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組相比無顯著性差異,提示二者與食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。3.GST-π蛋白與TOPO-Ⅱ蛋白在不同分化程度的食管鱗癌組織中的陽性表達(dá)率不同,GST-π蛋白表達(dá)水平隨著腫瘤組織分化程度增高而增高,TOPO-Ⅱ蛋白的表達(dá)則相反。提示二者蛋白異常表達(dá)與
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