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文檔簡介
1、目的:
本研究旨在檢測IL-33在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá),并探究IL-33在結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制中所發(fā)揮的作用,初步探索IL-33與結(jié)直腸癌的發(fā)病、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系,為探究結(jié)直腸癌新的診斷指標(biāo)、治療靶點(diǎn)提供新的研究方向。
方法:
以免疫組化的方法檢測50例結(jié)直腸腺瘤組織、50例結(jié)直腸癌患者腫瘤組織及癌周組織(大于癌周5cm)中IL-33的表達(dá),比較三組陽性表達(dá)率,并檢驗(yàn)IL-33的表達(dá)與結(jié)直腸病理特征的相關(guān)
2、性。于汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科收集2006年5月至2012年5月的以上組織蠟塊,其中,結(jié)直腸癌患者男性32例,女性18例,患者年齡分布為33——72歲,中位年齡48歲,臨床分期Ⅰ——Ⅱ期23例,Ⅲ——Ⅳ期27例,全部病例在術(shù)前均未行放、化療,術(shù)后病理診斷由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科完成。兔來源IL-33單克隆抗體于ABcam公司購買(USA),二抗試劑盒——ElivisionTM plus Polyer HRP(鼠/兔)
3、Kit-9902于蘇州碧云天生物技術(shù)公司購買(Beyotime Institute of Biotechnology),DAB顯色試劑盒購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司(Zhongshan Golden Bridge Biotechnology CO.LTD),SABC濃縮液購于北京索萊寶科技有限公司(Beijing Solarbio Science&Technology Co.Ltd).參照說明書按SABC法進(jìn)行檢測,鏡下觀察DAB顯
4、色,每一批檢測均設(shè)置PBS液代替一抗的陰性對照。
200倍鏡下觀察并用OLYMPUS圖像采集系統(tǒng)拍照,每張切片至少觀察5個隨機(jī)視野,觀察IL-33的表達(dá)情況。使用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析。應(yīng)用卡方檢驗(yàn)分析IL-33的表達(dá)情況??傮w生存率是指從手術(shù)日到癌癥死亡的時(shí)間段,利用Kaplan-Meier法繪制生存曲線。以P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.IL-33在癌旁組織、結(jié)直腸腺瘤和腺癌中
5、的表達(dá)有顯著性差異,其中在癌旁組織中表達(dá)量最低,在結(jié)直腸腺瘤中主要分布于表面上皮,與癌旁組織相比無顯著性差異(X2=0.488,P>0.05),結(jié)直腸腺癌組織中IL-33陽性表達(dá)率顯著高于癌旁黏膜組(X2=23.188,P<0.01)和結(jié)直腸腺瘤組(X2=17.647,P<0.01),且陽性信號富集于細(xì)胞漿和表面上皮。
2.IL-33表達(dá)與結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、分化程度無顯著相關(guān)性,而與腫瘤浸潤腸壁深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分
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