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文檔簡介
1、目的:
抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化是表觀遺傳學(xué)重要機(jī)制之一,在膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。術(shù)前抽取膠質(zhì)瘤患者的血清并對(duì)抑癌基因ppENK、EDNRB基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)進(jìn)行研究,探討腦膠質(zhì)瘤血漿中ppENK、EDNRB基因的甲基化狀況與蛋白表達(dá)的關(guān)系。
方法:
本組標(biāo)本來源于2010年11月~2012年7月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)治療的腦膠質(zhì)瘤患者,所有標(biāo)本均經(jīng)病理確診,術(shù)前未進(jìn)行放療
2、或化療。2例正常腦組織標(biāo)本來源腦外傷顱內(nèi)減壓手術(shù)患者,作為對(duì)照。男21例,女25例,年齡19~76歲,平均38.2歲。按WHO病理分級(jí),Ⅰ~Ⅱ級(jí)31例,Ⅲ~Ⅳ級(jí)15例。其中星型細(xì)胞瘤25例,膠質(zhì)母細(xì)胞瘤13例,少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤5例,室管膜瘤3例。標(biāo)本切除后經(jīng)液氮冷凍后,置-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。檢測46例腦膠質(zhì)瘤血清標(biāo)本中ppENK、EDNRB基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài),分析其甲基化程度、蛋白表達(dá)和臨床資料之間的相關(guān)性。
結(jié)
3、果:
本組46例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,經(jīng)初步檢測有44例DNA質(zhì)量合格,經(jīng)nPCR擴(kuò)增后檢測2種基因?qū)?yīng)的擴(kuò)增后產(chǎn)物,擴(kuò)增成功的例數(shù)分別為43例、40例。對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行甲基化測序,檢測出ppENK甲基化率為44.2%(19/43),EDNRB甲基化率為22.5%(9/40)。2例正常腦組織用以對(duì)照膠質(zhì)瘤組織甲基化的獨(dú)特性,并排除可能的非特異性反應(yīng),沒有檢測到甲基化現(xiàn)象。按WHO病理分級(jí),在低級(jí)別(I-II級(jí))膠質(zhì)瘤中ppENK基因啟動(dòng)
4、子甲基化率(33.3%)低于高級(jí)別(Ⅲ-IV級(jí))組甲基化率(69.2%)兩者之間存在顯著差別(p<0.05);46例腦膠質(zhì)瘤患者組織中ppENK、EDNRB甲基化的蛋白表達(dá)陽性率分別為57.8%(11/19)、55.5%(5/9),未甲基化的蛋白陽性表達(dá)率為87.5%(21/24),90.3%(28/31)?;颊吣挲g、性別、腫瘤病理類型等因素與ppENK、EDNRB基因甲基化無明顯相關(guān)。對(duì)ppENK、EDNRB基因甲基化狀態(tài)進(jìn)行Kapl
5、an-Meier生存曲線分析結(jié)果顯示:ppENK、EDNRB未甲基化的患者生存期要明顯長于基因甲基化的患者。
結(jié)論:
ppENK、EDNRB基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島中存在甲基化現(xiàn)象,基因啟動(dòng)子的CpG島的甲基化現(xiàn)象與膠質(zhì)瘤發(fā)生有關(guān)。基因甲基化率與蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,檢測基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)及蛋白表達(dá),可能為診斷腦膠質(zhì)瘤提供一種新的方法;可能成為腦惡性腫瘤基因治療提供重要的理論依據(jù),可能對(duì)了解腦膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后有重要的意
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