內(nèi)生細菌Em7對油菜菌核病的防治作用及機理初探.pdf

1、由核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum)所致的油菜菌核病是一種世界性病害，在世界各油菜產(chǎn)地均造成嚴重危害，在我國居油菜三大病害之首。目前由于尚未發(fā)現(xiàn)免疫和高抗品種，所以對油菜菌核病的防治仍以化學防治為主。但大量化學藥劑的使用將對人畜產(chǎn)生一定的毒害且造成嚴重的環(huán)境污染，并會導致病原菌產(chǎn)生抗藥性。國內(nèi)外已經(jīng)對油菜菌核病的生物防治進行了大量研究，但有關利用植物內(nèi)生細菌進行病害防治的研究報道極少。因此本試驗從小麥不同生育期、不

2、同部位分離獲得的內(nèi)生細菌中，篩選到1株對油菜菌核病具有較好防治效果的菌株Em7，并對其作用機理進行了初步研究。主要結果如下： 1.以油菜菌核病菌為靶標菌，在PDA培養(yǎng)基上采用平板對峙生長法，從63株小麥內(nèi)生細菌中篩選得到1株高效菌株Em7。該菌株對油菜菌核病菌的抑菌帶可達到15mm，對菌絲生長有明顯的抑制作用，并且能夠完全抑制菌核的形成和萌發(fā)。對Em7發(fā)酵液經(jīng)10000rpm離心后得到的上清液進行試驗，發(fā)現(xiàn)隨著稀釋倍數(shù)的增加，其

3、對菌絲生長和菌核萌發(fā)的抑制作用逐漸降低。 2.Em7發(fā)酵上清液對溫室苗期油菜菌核病的防治效果可達95.73％。在葉片上接種病菌菌餅前后不同時間噴施發(fā)酵上清液對病害均有防治作用，但防效之間差異顯著。接種前24h噴施防效為93.28％，效果最好；接種同時噴效果次之；接種后24h噴施防效為69.40％，效果最差。此外，隨著發(fā)酵上清液的稀釋，其防病效果逐漸降低。 3.液培法測定結果表明Em7發(fā)酵上清液具有較廣的抑菌譜。其對28株

4、植物病原真菌中的22株菌絲生長的抑制效果達50％以上，并對4種病原菌孢子的萌發(fā)具有極強的抑制作用；溫室盆栽結果表明，Em7對小麥條銹病、白粉病的防效也分別達到了71.36％、81.20％。 4.通過光學和掃描電子顯微鏡觀察，Em7對不同病原真菌菌絲生長發(fā)育的影響不同，主要分為以下幾類：(1)細胞質(zhì)外滲；(2)菌絲畸形；(3)菌絲叢生；(4)頂端膨大等。Em7發(fā)酵上清液經(jīng)硫酸銨沉淀，透析去鹽后的溶液對菌絲生長具有明顯抑制作用，初步

5、認為其抑菌活性可能是抗菌蛋白或多肽的作用。此外，Em7菌懸液對蘿卜、白菜種子萌發(fā)及生長具有一定的促進作用。 5.Em7無菌上清液對高溫具有一定的忍耐程度，100℃處理30min后，其抑菌作用與未處理的之間無顯著差異，且在堿性條件下較穩(wěn)定。經(jīng)過篩選，Em7在以下條件培養(yǎng)，獲得的無菌上清液抑菌活性最強。培養(yǎng)基成分：蛋白胨1％、牛肉浸膏0.5％、酵母粉0.5％、葡萄糖0.5％、NaCl0.5％；培養(yǎng)基起始pH7～8；培養(yǎng)溫度28℃。