植物次生代謝產(chǎn)物丁香酚防治油菜菌核病的研究.pdf

1、本研究以油菜菌核病菌(S. sclerotiorum)為供試菌，通過(guò)測(cè)定14種植物乙醇提取物的抑菌活性，發(fā)現(xiàn)丁香(Syzgyium aromaticum)提取物的抑制率為100％，抑制效果最好。確定其乙醇提取物中的主要活性物質(zhì)并進(jìn)行較深入的研究。 在植物提取物對(duì)油菜菌核病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)供試提取物濃度為20mg干樣．mL<'-1>時(shí)，魚(yú)腥草(Houttuynia cordat)、香附(Cyperus rotund

2、us)、烏梅(Prunusmune)、知母(Anemarrhena asphodeloides)、萊菔子(Raphnus sativus)和丁香(Syzgyiumaromalicum)抑菌率均達(dá)50％以上，其中丁香提取物的抑菌活性突出，抑菌率達(dá)100％。 在丁香提取物抑菌活性物質(zhì)的分析試驗(yàn)中，利用氣．質(zhì)譜分析鑒定出丁香酚在提取物中的相對(duì)含量為54.704％,確定丁香酚是丁香乙醇提取物中的主要成分；丁香酚對(duì)14種供試植物病原真菌的

3、EC50均低于200μg·mL<'-1>，供試菌株中小麥紋枯病菌(Rhizoctoniacerealis)、油菜菌核病菌(S.sclerotiorum)和水稻稻瘟病菌(Pyricularia grisea)對(duì)丁香酚較敏感，EC<,50>為31.04μg·mL<'-1>、39.94μg·mL<'-1>和29.33μg·mL<'-1>表明其具有較廣的抑菌譜。通過(guò)菌絲生長(zhǎng)抑制法和菌絲干重法確定其對(duì)油菜菌核病菌菌絲的生長(zhǎng)抑制作用。 離體

4、葉片試驗(yàn)和盆栽藥效試驗(yàn)表明：丁香酚制劑在濃度為300μg·mL<'-1>，400μg·mL<'-1>，500μg·mL<'-1>時(shí)對(duì)油菜菌核病均有一定的治療和保護(hù)作用。離體葉片試驗(yàn)中，丁香酚500μg·mL<'-1>的治療和保護(hù)效果分別為65.33％和62.55％；盆栽試驗(yàn)中，丁香酚500μg·mL<'-1>的治療和保護(hù)作用為62.91％和54.2％。 丁香酚對(duì)油菜菌核病菌抑菌機(jī)制的初步研究，發(fā)現(xiàn)丁香酚能夠延遲病菌菌核的形成時(shí)間

5、：對(duì)菌核萌發(fā)菌絲有抑制作用；50μg·mL<'-1>丁香酚處理的菌絲內(nèi)部有大量囊泡結(jié)構(gòu)產(chǎn)生：對(duì)菌體內(nèi)可溶性蛋白的含量，鈣含量及ATP酶活性的測(cè)定結(jié)果表明，丁香酚處理生長(zhǎng)中的病菌菌，能夠降低菌體內(nèi)可溶性蛋白的含量和鈣含量；處理離體質(zhì)膜懸浮液丁香酚能使菌絲質(zhì)膜上的．ATP酶活性降低。初步研究了丁香酚對(duì)油菜菌核病菌菌絲體內(nèi)物質(zhì)交換與能量變化等生命活動(dòng)的影響。 通過(guò)紫外燈照射和高濃度丁香酚馴化兩種方法對(duì)供試油菜菌核病菌進(jìn)行抗性誘變。