改變氧化-抗氧化水平對體外培養(yǎng)胃癌細胞增殖的影響.pdf

1、目的：
　　本實驗從何首烏塊根中提取何首烏總苷(polygonum multiflorum totalglycoside，PMTG)，通過調節(jié)抗氧化劑-何首烏總苷(PMTG)和過氧化劑-過氧化氫(hydrogen peroxide，HP)濃度改變過氧化-抗氧化水平，觀察不同過氧化-抗氧化水平對體外培養(yǎng)胃癌細胞株SGC-7901生長的影響并探求其可能機制
　　方法：
　　1.MTT法檢測兩種藥物分別處理后不同氧化水平對胃

2、癌細胞SGC-7901的增殖影響，計算出半數(shù)抑制濃度IC50，確定等效曲線;
　　2.流式細胞檢測雙藥處理后細胞內活性氧(reactive oxygen species，ROS)濃度的變化;
　　3.實時熒光定量PCR檢測不同濃度雙藥處理后Nrf2、和下游抗氧化HO-1和NQO1基因的表達。
　　結果：
　　1.PMTG在體外能明顯抑制人胃癌SGC7901細胞增殖，且呈濃度梯度依賴性(P＜0.01)，IC50=2

3、21μg/L; HP在體外能明顯抑制人胃癌細胞增殖，呈濃度梯度依賴性(P＜0.01)，IC50=52μ mol/L。
　　2.流式細胞DCF法可檢測到細胞內ROS改變， SGC細胞內ROS濃度與PMTG處理濃度呈負相關，與HP處理濃度呈正相關。
　　3.rt-PCR法檢測凋亡相關下游基因HO-1及NQO1基因表達的情況，PMTG處理組相關基因的表達均明顯高于陰性對照組(P＜0.01); PMTG可上調HO-1基因表達，上調N