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1、側(cè)向免疫層析是一種簡(jiǎn)便、快速的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)技術(shù),在生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛?;谀z體金標(biāo)記的免疫層析技術(shù)早已實(shí)現(xiàn)在臨床診斷、流行病篩查、環(huán)境與食品監(jiān)測(cè)等方面的大規(guī)模商業(yè)應(yīng)用。但基于光學(xué)分析方法的金標(biāo)免疫層析技術(shù)只能實(shí)現(xiàn)層析膜表層信號(hào)的檢測(cè),層析膜表層以下的信號(hào)無(wú)法測(cè)量,因而無(wú)法實(shí)現(xiàn)真正意義上的定量分析。
超順磁性納米粒已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于超順磁性納米粒的磁信號(hào)可穿透層析膜,從而克服了膠體金標(biāo)記無(wú)法定量的缺陷,具有靈敏度高
2、、干擾性低、可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。但目前超順磁性納米粒在免疫分析方面的應(yīng)用研究主要集中在磁分離免疫分析技術(shù),磁性免疫層析技術(shù)的研究相對(duì)較少。
與磁分離所需的大粒徑磁微粒不同,用于磁性免疫層析的磁性復(fù)合納米粒應(yīng)該具備粒徑較小(100~300nm)且均一、穩(wěn)定分散、磁含量高、易于生物分子標(biāo)記等特點(diǎn),這也是研究者們目前亟待解決的一些難題。目前國(guó)內(nèi)仍沒(méi)有適應(yīng)用于磁性免疫層析的商品化磁性復(fù)合納米粒。本論文旨在研究?jī)?yōu)化用于磁性免疫層析的小
3、粒徑磁性復(fù)合納米粒的制備方法。主要研究?jī)?nèi)容包括:
1)分別采用Stber溶膠-凝膠法和反相微乳液法,優(yōu)化二氧化硅納米粒的制備條件;考察反相微乳液法制備二氧化硅納米粒的影響因素,確定合適的反相微乳液體系。
2)采用不同來(lái)源的磁性納米粒作為核,對(duì)反相微乳液法制備核-殼結(jié)構(gòu)二氧化硅磁性納米粒的條件進(jìn)行優(yōu)化;通過(guò)DLS和TEM對(duì)復(fù)合粒子的粒徑大小和粒度分布進(jìn)行表征,并與Stber法進(jìn)行對(duì)比。
3)將二氧化硅磁性納米
4、粒進(jìn)行免疫層析實(shí)驗(yàn),初步驗(yàn)證其作為免疫層析定量檢測(cè)的標(biāo)記材料的可行性。
最終,采用反相微乳液法制備出以水溶性Fe3O4-DMSA為核的二氧化硅磁性納米粒,平均粒徑在100nm左右,包裹率較高,且具有一定的磁響應(yīng)性。研究發(fā)現(xiàn),磁性納米粒加入體系中的順序很關(guān)鍵,在TEOS水解后形成初級(jí)silica粒子(<5nm)再加入磁性納米粒,可以形成復(fù)合粒子;反之,則包裹率較低。磁層析結(jié)果表明,氨基修飾的二氧化硅磁性納米粒有免疫競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng),有望
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