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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本研究將來(lái)自沈陽(yáng)地區(qū)的慢性苯中毒患者及同樣接觸苯而未發(fā)病的健康人群匹配后進(jìn)行病例對(duì)照研究,采集外周血,提取DNA后,應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)ERCC1Asn118Asn(rs11615),C8092A(rs3212986);ERCC2/XPD Lys751Gln(rs13181)、Asp312Asn(rs1799793)和Arg156Arg(rs238406)SNP基因多態(tài)位點(diǎn)的分布情況;同時(shí)進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查,獲取研
2、究對(duì)象的接觸苯的濃度及年限等信息建立數(shù)據(jù)庫(kù),分析ERCC1和ERCC2/XPD候選SNP基因型和慢性苯中毒遺傳易感性的關(guān)聯(lián),為找尋慢性苯中毒易感人群的生物標(biāo)志及其防治研究提供一定的理論依據(jù)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。
方法:
研究對(duì)象的確定:按照1:2配比的原則(年齡、性別、工種、接觸苯的年限匹配),病例組是來(lái)自沈陽(yáng)地區(qū)的確診為慢性苯中毒的102名患者,對(duì)照組為同樣來(lái)自于沈陽(yáng)地區(qū),與中毒患者相同性別、接觸苯的年齡和工齡相近而
3、未發(fā)生中毒的人員204名,研究對(duì)象均為漢族。
問(wèn)卷調(diào)查:對(duì)每個(gè)研究對(duì)象的人口學(xué)特征、既往病史、家族史、職業(yè)史、職業(yè)病診斷情況及生活方式(吸煙、飲酒)等進(jìn)行調(diào)查。
血樣采集:經(jīng)知情同意后每個(gè)研究對(duì)象采集靜脈血樣2ml,EDTA抗凝。
DNA制備:采用酚氯仿抽提法提取全血DNA,-20℃凍存。
ERCC1基因和ERCC2/XPD基因多態(tài)性的檢測(cè)及分析:TaqMan()熒光實(shí)時(shí)定量PCR
4、法檢測(cè)ERCC1Asn118Asn(rs11615),C8092A(rs3212986)SNP位點(diǎn)基因型;ERCC2/XPD Lys751Gln(rs13181),Asp312Asn(rs1799793)和Arg156Arg(rs238406)的基因型。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,Pearson X2檢驗(yàn)用于比較病例組和對(duì)照組之間的分布差異;分析基因多態(tài)位點(diǎn)和慢性苯中毒易感性是否有關(guān),以比值比(
5、odds ratio,OR)及其95%可信限(95%confidence interval,95%CI)表示關(guān)聯(lián)強(qiáng)度。為了控制潛在的混雜因素如性別、工齡、吸煙和飲酒,采用logistic回歸計(jì)算校正后的OR值及95%CI。以性別、累積接觸水平、吸煙、飲酒和不同多態(tài)的基因型作為分層因素,計(jì)算各層的P直、OR值及95%CI。當(dāng)P<0.05時(shí),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
病例組和對(duì)照組年齡、性別、工種及接觸苯年限
6、差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明病例組和對(duì)照組匹配。ERCC1 Asn118Asn(rs11615)TT基因型可使慢性苯中毒發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增高(ORadj=3.251,95%CI=1.365-7.743,X2=6.718,P=0.010),而尚未發(fā)現(xiàn)ERCC1 C8092A(rs3212986),ERCC2/XPD Lys751Gln(rs13181),Asp312Asn(rs1799793)和Arg156Arg(rs238406)等位點(diǎn)與慢性苯中毒發(fā)
7、生的關(guān)聯(lián)。分層分析顯示ERCC1 Asn118Asn(rs11615)TT基因型可使不吸煙人群CBP風(fēng)險(xiǎn)增高(OR=3.214,95%CI=1.359~7.601,X2=7.610,P=0.006)。飲酒對(duì)ERCC1和ERCC2/XPD基因型人群發(fā)生慢性苯中毒并無(wú)影響,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
在相同的苯作業(yè)暴露環(huán)境下,攜帶ERCC1Asn118Asn(rs11615)TT基因型的個(gè)體發(fā)生慢性苯中毒的風(fēng)險(xiǎn)增
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