中藥三七和重樓對(duì)膜性腎病大鼠的治療作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：膜性腎病(membranous．nephrgpathy：MN)是成人原發(fā)性腎小球腎炎的常見病理類型，其發(fā)病機(jī)理主要是原位免疫復(fù)合物沉積于腎臟。本研究應(yīng)用陽(yáng)離子化牛血清白蛋白(C-BSA)誘發(fā)膜性腎病大鼠模型，探討中藥三七和重樓對(duì)該模型大鼠的治療作用及機(jī)制，為臨床治療原發(fā)性腎小球腎炎提供理論依據(jù)。 方法：選用雄性SD大鼠45只，隨機(jī)選5只作為正常對(duì)照組，其余40只尾靜脈注射C-BSA復(fù)制膜性腎病模型，4周后造模成功，將34只

2、存活大鼠隨機(jī)分為模型組、三七組、重樓組、雷公藤組，共5組。各治療組以相應(yīng)藥物灌胃治療4周，正常對(duì)照及模型組予以普通喂養(yǎng)。檢測(cè)大鼠造模前、造模開始后第3、4、8周末尿蛋白，第8周末的血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)。觀察第8周末腎組織免疫熒光、光鏡、電鏡病理改變，并用免疫組化法檢測(cè)腎組織內(nèi)IV型膠原(ColIV)、I型纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-

3、9)的表達(dá)水平。 結(jié)果：①實(shí)驗(yàn)第3周造模各組尿蛋白升高，于第4周達(dá)到頂峰，各治療組8周末的24小時(shí)尿蛋白定量與4周末比較顯著降低(P<0.01)，且顯著低于模型組(P<0.05)，各治療組間無(wú)明顯差異。②各組血清BUN、Cr無(wú)明顯差異；模型組與正常組比較，血清TG、TC均明顯升高，血清ALB明顯降低(P<0.05)；各治療組的TG分別與正常組、模型組比較均無(wú)顯著性差異，TC均明顯低于模型組，ALB均顯著高于模型組(P<0.05)

4、，各治療組間無(wú)明顯差異。③免疫熒光示IgG和C<,3>沿毛細(xì)血管攀和部分系膜區(qū)沉積，各治療組IgG、C3的沉積均較模型組顯著減弱(P<0.01或P<0.05)，各治療組間無(wú)顯著差異。④光鏡下觀察模型組腎小球明顯腫脹，球內(nèi)細(xì)胞數(shù)增多，腎小球基底膜增厚，節(jié)段性釘突形成，上皮下嗜復(fù)紅物質(zhì)沉積；各治療組基底膜增厚不明顯，上皮下沉積物均較少。半定量分析示模型組的腎小球球內(nèi)細(xì)胞數(shù)、腎小球直徑、截面積均明顯大于正常組(P<0.05)：三七組各指標(biāo)與模

5、型組比較均無(wú)明顯改善；重樓組與模型組比較，球內(nèi)細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯減少，但直徑、截面積小于模型組(P<0.05)；雷公藤組各指標(biāo)均顯著小于模型組(P<0.05)。⑤電鏡觀察示模型組基底膜顯著不規(guī)則增厚，有大塊狀電子致密物沉積于上皮下，足細(xì)胞空泡變性，足突廣泛融合、絨毛化；三七組基底膜仍稍有增厚，但厚度明顯小于模型組，重樓組和雷公藤組基底膜增厚不明顯，三組上皮下可見少量沉積物，足突部分融合。⑥免疫組化示各治療組的ColIV、PAl-1和MMP-9

6、的表達(dá)量分別與模型組比較均明顯降低(P<0.01)，但仍顯著高于正常組(P<0.01)；各治療組間比較，其中三七組PAl-1、MMP-9表達(dá)量均高于雷公藤組(P<0.05)，重樓組PAl-1表達(dá)量也高于雷公藤組(P<0.05)。⑦24小時(shí)尿蛋白定量與ColIV、PAI-1和MMP-9的表達(dá)量均呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。 結(jié)論：①成功地復(fù)制了以C-BSA誘發(fā)的膜性腎病大鼠模型；②中藥三七和重