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1、人白細(xì)胞介素11(hIL-11)是一種多功能的細(xì)胞因子,其最基本的功能在于造血調(diào)控作用,它能刺激人的造血祖細(xì)胞和巨核細(xì)胞前體的分化并誘導(dǎo)巨核細(xì)胞的生成和成熟,最終導(dǎo)致血小板數(shù)量的增加。美國FDA于1997年批準(zhǔn)該產(chǎn)品上市,用于防止化療引起的再生性血小板減少癥。它是目前全世界唯一已用于臨床的促進(jìn)血小板生成的藥物。其臨床實驗研究表明其作用于人體的有效劑量(約25~50μg/kg)遠(yuǎn)高于其它一些用于臨床治療的重組細(xì)胞因子藥物,大劑量應(yīng)用易于引
2、起體內(nèi)免疫原性,致使其體內(nèi)生物學(xué)活性明顯降低。 聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修飾可以克服重組人白細(xì)胞1l上述的不足,它將一種高分子化合物的聚乙二醇衍生物修飾劑通過化學(xué)反應(yīng),定點偶聯(lián)到重組人白細(xì)胞介素11的分子上。本研究利用人白細(xì)胞介素11本身不含Cys殘基,通過定點突變在不影響其生物學(xué)活性的N末端引入一個Cys殘基,mPEG-馬來酰亞胺通過與Cys殘基的巰基側(cè)鏈特異性共價結(jié)合反應(yīng),將mPEG定點偶聯(lián)
3、到定點突變的重組人白細(xì)胞介素11上。mPEG-馬來酰亞胺不與沒有發(fā)生定點突變的(無Cys殘基)發(fā)生明顯反應(yīng),而與發(fā)生定點突變的含有Cys殘基的重組人白細(xì)胞介素11發(fā)生明顯的反應(yīng),只有一個定點聚乙二醇修飾產(chǎn)物。 通過本研究,獲得了N末端定點突變的重組人白細(xì)胞介素11,然后利用mPEG-馬來酰亞胺對其進(jìn)行定點偶聯(lián),獲得了人白細(xì)胞介素11定點聚乙二醇修飾產(chǎn)物。研究結(jié)果表明,定點PEG修飾人白細(xì)胞介素11能夠得到均一的修飾產(chǎn)物,而且其體
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