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1、第一部分非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中hMLH1基因及蛋白表達(dá)研究;hMLH1基因是定位于3p21.3-22區(qū)段的抑癌基因,是6個(gè)人類錯(cuò)配修復(fù)(mis-match repair,MMR)基因之一.MMR基因可修復(fù)DNA復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)的堿基錯(cuò)配,又可以消除由于含簡(jiǎn)單重復(fù)序列的同源之間的遺傳重組出現(xiàn)的不配對(duì)堿基序列,可有效防止DNA復(fù)制差錯(cuò)(replication errors,RER)的產(chǎn)生.MMR基因的失活可導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定性,由此可能造
2、成微衛(wèi)星不穩(wěn)定性、相關(guān)抑癌基因改變,最終形成細(xì)胞的惡變,形成腫瘤.研究發(fā)現(xiàn)hMLH1基因與肺癌的發(fā)生關(guān)系密切.我們應(yīng)用PCR-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳-銀染方法檢測(cè)hMLH1基因雜合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),利用甲基化敏感性限制性核酸內(nèi)切酶HpaⅡ/MspⅠ酶切—PCR方法檢測(cè)異常甲基化,通過(guò)免疫組化染色方法分析hMLH1基因蛋白表達(dá)情況,進(jìn)而對(duì)非小細(xì)胞肺癌組織中hMLH1基因在肺癌中的完全失活機(jī)制進(jìn)
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