EVI1基因?qū)和毙粤馨图?xì)胞白血病致病機(jī)制的初步研究_3740.pdf

1、目的：
　　初步探討EVI基因在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)中的致病機(jī)制。
　　方法：
　　l、收集2015年5月01日至2016年9月30日就診于青島大學(xué)附屬醫(yī)院血液兒科的30例新發(fā)ALL患兒的骨髓，就診時(shí)患兒年齡均小于16歲，同時(shí)收集6例正常兒童捐獻(xiàn)的骨髓作為正常對(duì)照。提取骨髓樣本的總RNA，熒光定量qRT-PCR檢測(cè)EVI1 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平，比

2、較ALL患兒與正常對(duì)照之間EVI1 mRNA的表達(dá)差異。
　　2、選取年齡及病情相匹配的患兒2例，進(jìn)行EVI1基因（+）及EVI1基因（-）ALL患兒骨髓RNA行轉(zhuǎn)錄組基因測(cè)序，通過(guò)部分基因的差異性表達(dá)初步探索EVI1基因在兒童ALL中的致病機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1、對(duì)ALL患兒及正常兒童骨髓細(xì)胞的EVIl基因表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，患兒正常對(duì)照EVI1 mRNA表達(dá)水平從17.7到20.1，中位表達(dá)水平18.9；ALL患兒

3、EVI1 mRNA表達(dá)水平從0.75到4096，中位表達(dá)水平934.65；ALL和正常對(duì)照的EVI1 mRNA整體相比也有顯著差異（p=0.01）。并從中篩選出年齡性別病情相匹配且RNA標(biāo)本濃度適合轉(zhuǎn)錄組基因測(cè)序的標(biāo)本；
　　2、EVI1（+）ALL患兒EVI1基因有一長(zhǎng)度為638bp的轉(zhuǎn)錄版本,該轉(zhuǎn)錄版本在EVI1（-）的患兒中未見(jiàn)表達(dá)；
　　3、將兩樣本差異表達(dá)基因數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，EVI1陽(yáng)性ALL患兒較EVI1陰性ALL

4、患兒共有1387個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，1097個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。將上調(diào)基因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)a.造血干細(xì)胞相關(guān)且被EVI1基因調(diào)控轉(zhuǎn)錄的基因包括GATA2、BCL-xL、C／EBPα；b.伴有EVI1陽(yáng)性的ALL中粒系相關(guān)基因表達(dá)明顯上調(diào)，如MPO及CD34、CD13、CD33、CD116、CD114、CD124、CD125、CD126及 CD11b；c.EVI1陽(yáng)性ALL標(biāo)本中ECM受體表達(dá)明顯升高。
　　結(jié)論:
　　1、ALL患兒中

5、EVI1基因表達(dá)量比正常骨髓表達(dá)量明顯升高。
　　2、EVI1（+）ALL患兒EVI1基因有一長(zhǎng)度為638bp的轉(zhuǎn)錄版本,該轉(zhuǎn)錄版本在EVI1(-)的患兒中未見(jiàn)表達(dá)；
　　3、EVI1陽(yáng)性ALL患兒與EVI1陰性ALL患兒相比共有1387個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，1097個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。上調(diào)基因包括造血干細(xì)胞相關(guān)且被EVI1基因調(diào)控轉(zhuǎn)錄的基因（GATA2、BCL-xL、C／EBPα）、粒系相關(guān)基因（MPO、CD34、CD13、CD33