造血干細胞髓系分化中相關基因組蛋白修飾特征的研究.pdf

1、中南大學博士學位論文造血干細胞髓系分化中相關基因組蛋白修飾特征的研究姓名：唐華容申請學位級別：博士專業(yè)：內科學指導教師：陳方平20090501博士學位論文 中文摘要第一部分臍帶血來源的C D 3 4 + C D 3 8 ’細胞的體外純化和向各系的誘導分化目的：建立一個可行的從臍帶血中分選出C D 3 4 + C D 3 8 ‘細胞的方法，并在體外摸索出有效的粒系、紅系和巨核系的分化體系，為后續(xù)實驗提供可靠的細胞標本。方法：①采用免疫磁珠

2、分選法( m a g n e t i c a c t i v a t e d c e l l s o r t i n g ,M A C S ) 正性分選出C D 3 4 + 細胞，再通過二次負性分選選出C D 3 4 + C D 3 8 ‘的細胞并用流式細胞術檢測其純度和用臺盼藍拒染法檢測細胞活率。②在體外應用S C F + I L ．3 + G —C S F 或E P O 或T P O 細胞因子的組合分別誘導C D 3 4 + C D

3、 3 8 ‘的細胞向粒系、紅系以及巨核系分化。用細胞計數法繪制其各系細胞的增殖曲線及用流式細胞術檢測誘導分化的效率。結果：①用抗C D 3 4 磁珠第一次分選C D 3 4 + 細胞后，C D 3 4 + 細胞的純度可達9 5 ．2 4 + 1 ．0 3 ％：第二次分選后，C D 3 4 + ／C D 3 8 ’細胞的純度為9 0 ．2 3 4 - 2 ．5 2 ％。分選前后細胞活力為均可達9 9 ％以上。②體外誘導分化1 4 天時，粒

4、系細胞數增加了1 1 8 6 ．6 7 i ：1 0 6 ．1 倍，紅系細胞數增加了8 9 4 ．6 7 + 4 8 ．2 2 倍，巨核系細胞數增加了6 2 7 + 4 9 ．6 5 倍。③流式細胞術檢測的結果表明，在誘導分化的第1 4 天，C D l 5 + 細胞的比率為9 1 ．4 9 ％，C D 2 3 5 a + 細胞的比率為9 5 ．5 5 ％，C D 4 1 a + 細胞的比率為8 6 ．5 2 ％。結論：我們建立了有效的M