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文檔簡介
1、[背景]
在世界范圍內(nèi),胃癌是常見的惡性腫瘤之一,患病率僅次于肺癌,每年的死亡人數(shù)達(dá)60多萬。常用的治療方法是手術(shù)加化療。但大約65%的患者在診斷明確時就已經(jīng)發(fā)生了侵襲或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,從而使病人失去了徹底切除腫瘤的機(jī)會,增加了治療的困難。中晚期胃癌患者的5年的生存率非常低,5年的生存率約為5-15%。胃癌已成為嚴(yán)重影響公眾健康的疾病。
棉酚是從棉籽中萃取的天然聯(lián)苯化合物,早在20世紀(jì)八十年代,人們發(fā)現(xiàn)棉酚具有抗腫瘤活性。
2、棉酚作為非肽類小分子Bcl-2家族蛋白抑制劑,具有來源豐富、成本低、臨床應(yīng)用安全性高、毒性小等優(yōu)勢,并可與化療、放療等發(fā)揮協(xié)同治療作用,在生物利用度、活體內(nèi)安全性和穩(wěn)定性等方面也具有顯著的優(yōu)越性。尤其是棉酚衍生物Apogossypolone(ApoG2),其對骨髓等正常組織的毒副作用小,抑瘤效果更強(qiáng),患者耐受性好,在淋巴瘤、鼻咽癌、前列腺癌等腫瘤中表現(xiàn)出了良好的抗癌活性和與其他治療方法的協(xié)同作用,通過PUBMED、中國知網(wǎng)、萬方等數(shù)據(jù)庫
3、及谷歌學(xué)術(shù)搜索的查閱,發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外關(guān)于去醛基棉酚醌(ApoG2)對胃癌的作用少有報(bào)道。本課題將圍繞ApoG2對胃癌SGC7901細(xì)胞體外的增殖、凋亡及侵襲能力的影響進(jìn)行研究,并進(jìn)一步研究其分子機(jī)制。
[目的]
1、觀察去醛基棉酚醌在體外對胃癌SGC7901細(xì)胞增殖和凋亡的影響;
2、觀察去醛基棉酚醌在體外對胃癌SGC7901細(xì)胞粘附和侵襲能力的影響。[方法]
1、采用MTT法,檢測不同濃度的ApoG
4、2作用于SGC7901細(xì)胞24、48和72h后,對細(xì)胞生長影響;
2、MGG染色法觀察不同濃度的ApoG2作用24h后細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化;
3、流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度的ApoG2作用24h后細(xì)胞凋亡;
4、MTT法檢測ApoG2對細(xì)胞黏附能力的影響;
5、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)和侵襲小室法檢測其對細(xì)胞轉(zhuǎn)移及侵襲能力的影響;
6、RT-PCR方法檢測ApoG2作用細(xì)胞24h后,SGC7901細(xì)胞中bc
5、l-2、bax、NF-ΚBmRNA表達(dá)量的變化。
[結(jié)果]
1、隨著時間的延長和藥物濃度的增大,ApoG2抑制胃癌細(xì)胞增殖的作用逐漸增強(qiáng),呈時間和劑量依賴性(P<0.05),24、48和72h的半數(shù)抑制濃度分別為32.58、25.11、14.16μmol/L;
2、MGG染色可見隨著藥物濃度的增大,細(xì)胞的生長變慢,胞漿變疏松,細(xì)胞核深染,核漿比例增大,出現(xiàn)典型的細(xì)胞死亡形態(tài);
3、流式細(xì)胞術(shù)檢測可
6、見細(xì)胞凋亡,經(jīng)不同濃度的ApoG2處理24h后,SGC7901細(xì)胞發(fā)生凋亡,且隨藥物濃度的增加凋亡率明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
4、用ApoG2處理SGC7901細(xì)胞后,可明顯降低SGC7901細(xì)胞的粘附、遷移及遷徙能力;
5、RT-PCR檢測結(jié)果顯示,藥物干預(yù)后,胃癌細(xì)胞中bcl-2、NF-ΚB的mRNA表達(dá)降低,而bax的表達(dá)量升高(P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[結(jié)論]
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