SIVmac251不同途徑感染中國(guó)恒河猴的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、性傳播(黏膜途徑)是艾滋病的主要傳播途徑之一，建立粘膜感染動(dòng)物模型具有非常重要的意義。目前，國(guó)內(nèi)缺乏對(duì)靜脈和粘膜感染的對(duì)比性研究，本實(shí)驗(yàn)用SIVmac251經(jīng)靜脈、陰道和直腸三種途徑感染恒河猴，對(duì)SIV的感染情況、不同感染途徑是否對(duì)臨床表現(xiàn)、病毒學(xué)指標(biāo)及基因變異上存在影響以及影響程度等問(wèn)題進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。 SIVmac251通過(guò)靜脈、陰道和直腸三種途徑各感染恒河猴1只，通過(guò)對(duì)病毒分離、血漿病毒載量、PBMC中前病毒DNA檢測(cè)、C

2、D4<'+>/CD8<'+>比值等一系列指標(biāo)的測(cè)定，表明三種途徑均成功感染實(shí)驗(yàn)猴，同時(shí)建立了黏膜感染動(dòng)物模型。 臨床發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)猴在感染后14天出現(xiàn)食欲減退，并持續(xù)兩周左右，體重有所下降，腹股溝等處淺表淋巴結(jié)腫大。靜脈感染猴S153感染后半年時(shí)，食欲減退，體重下降，腹瀉，腹股溝淋巴結(jié)變小，六個(gè)半月時(shí)死亡。用SYBR Green I熒光染料實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法檢測(cè)病毒，各途徑感染病毒血癥出現(xiàn)時(shí)間有先后差別，分別為：靜脈3d、直腸7

3、d和陰道10d，沒(méi)有觀察到高峰期延遲現(xiàn)象，都是在14d達(dá)到高峰，以后迅速下降。用病毒分離的方法，兩只粘膜感染猴S142和S172較靜脈感染猴S153有高峰期延長(zhǎng)現(xiàn)象。 抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，靜脈感染猴在感染后10d時(shí)抗體轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，整個(gè)感染過(guò)程中抗體水平都很低，最高滴度為1：80；兩只黏膜感染猴在14d時(shí)抗體轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期抗體水平一直比較高，陰道感染猴S142最高到1：5120，直腸感染猴S172最高到1：2560。 同

4、時(shí)發(fā)現(xiàn)，在42w時(shí)兩只黏膜感染猴組織中病毒載量很高，陰道感染猴1.118E+08，直腸感染猴1.288E+07；淋巴結(jié)病理切片顯示，處于病程進(jìn)展期；這時(shí)血漿中病毒載量卻很低，陰道感染猴4.322E+03，直腸感染猴為陰性。 CD4<'+>/CD8<'+>比值和CD4<'+>細(xì)胞數(shù)變化趨勢(shì)基本一致，在28d時(shí)CD4<'+>/CD8<'+>比值倒置。 nef和env vlv2兩段基因在病毒感染急性期中基因變異研究，從測(cè)序結(jié)果看，三種

5、途徑感染后在env段沒(méi)有表現(xiàn)出很大的差別；血漿中nefRNA和DNA的變異情況都表現(xiàn)出了不同途徑上的差異，三種途徑nefRNA均在兩個(gè)位點(diǎn)發(fā)生穩(wěn)定的突變，靜脈感染猴在nefDNA中卻沒(méi)有穩(wěn)定突變的產(chǎn)生。陰道感染猴S142和直腸感染猴S172 nef DNA和RNA分別在很多位點(diǎn)都發(fā)生了突變，這些位點(diǎn)并不相同。 SIV不同途徑成功感染中國(guó)恒河猴和SIV不同途徑感染后的實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)于更好的認(rèn)識(shí)艾滋病，解讀發(fā)病機(jī)制，對(duì)于疫苗設(shè)計(jì)及評(píng)價(jià)