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1、目的:從SLMHT根提取物中篩選抗腫瘤活性成分和探討其抗腫瘤作用機(jī)制。 方法:采用MTT法、集落形成法篩選SLMHT根提取物的抗腫瘤活性成分;用原位免疫組化(Tunel)法、瑞氏和吉姆薩混染法、Hoechst33258-PI雙染色法觀察SLMHT根提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響;用FCM法觀察SLMHT根提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響;用Comet(彗星)瓊脂糖單細(xì)胞電泳法,觀察SLMHT根提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞DNA損傷的影響,探
2、討其抗腫瘤作用機(jī)制。 結(jié)果:SLMHT根粗提物山C可抑制白血病細(xì)胞株L1210和P388D1、宮頸癌細(xì)胞株Hela、胃癌細(xì)胞株SGC7901、黑色素瘤細(xì)胞株B16、神經(jīng)性腫瘤細(xì)胞株NG108-15、肝癌細(xì)胞株Bele7404等7種腫瘤細(xì)胞株的增殖。從山C中再提取的6種單體化合物中,R6和R8可抑制L1210、SGC7901、NG108-15、Bele7404腫瘤細(xì)胞株的增殖;山C、R6和R8對(duì)脾淋巴細(xì)胞沒(méi)有免疫毒性;Tunel、
3、Hoechst33258-PI雙染色法、瑞氏和吉姆薩混染法均顯示山C及其再提取物R6和R8可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;FCM法檢測(cè)也顯示山C、R6和R8、可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并伴隨G2/M期細(xì)胞的增加;山C、R6和R8可引起腫瘤細(xì)胞的DNA損傷,R6作用最強(qiáng),與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論:SLMHT根粗提物山C及其再提取物R6和R8有抗腫瘤活性;R6和R8為SLMHT根提取物的抗癌有效活性成份,其體外抗腫瘤作用機(jī)制可能通過(guò)阻滯
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