辛伐他汀對(duì)膿毒癥大鼠心肌細(xì)胞NF-κB，iNOS表達(dá)的影響及意義.pdf

1、目的:膿毒癥是由感染所引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS),并最終可能導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征(MODS)。雖然近些年關(guān)于膿毒癥的治療取得重要進(jìn)展,如:活化蛋白C的應(yīng)用,早期液體目標(biāo)治療策略等使嚴(yán)重膿毒癥和膿毒癥休克患者的生存率有所提高,但其死亡率仍然很高。他汀類藥物即3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑是目前治療膽固醇所致心血管疾病的一線用藥,它們作用于內(nèi)源性膽固醇合成的限速階段而抑制其合成,從而有效地降低低密

2、度脂蛋白和極低密度脂蛋白水平,同時(shí)可以適當(dāng)?shù)奶岣吒呙芏戎鞍姿?降低甘油三酯。最近的研究發(fā)現(xiàn)他汀類藥物不但可以調(diào)節(jié)血脂水平,同時(shí)具有很多其它生物效應(yīng),如:抗炎作用、抗氧化作用、免疫調(diào)節(jié)、抗細(xì)胞凋亡、抗凝血及保護(hù)血管內(nèi)皮的作用,這種現(xiàn)象稱為他汀藥的多效性,并且這種作用與降低血脂無(wú)關(guān)。目前大量的研究發(fā)現(xiàn)認(rèn)為他汀類藥物可能對(duì)膿毒癥的預(yù)防和治療有重要意義。
　　 嚴(yán)重膿毒癥和膿毒癥休克時(shí)心血管系統(tǒng)往往受累。從臨床與基礎(chǔ)的角度,人們對(duì)膿

3、毒癥時(shí)心血管系統(tǒng)的功能障礙已經(jīng)進(jìn)行了長(zhǎng)時(shí)間的研究。目前普遍認(rèn)為膿毒癥時(shí)心肌收縮力的下降和順應(yīng)性的降低是心功能障礙的主要因?yàn)?這其中涉及多種因素,包括心肌缺血、心肌抑制物、細(xì)胞因子、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)和前列腺素類物質(zhì)的作用等,其中大量研究發(fā)現(xiàn)高水平的NO可以抑制心肌收縮功能。
　　 NO是由一氧化氮合酶(NOS)催化左旋精氨酸合成的。人體內(nèi)有三種不同的NOS:神經(jīng)型一氧化氮合酶(nNOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶

4、(iNOS)和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)。其中eNOS及nNOS又被稱為結(jié)構(gòu)型一氧化氮合酶(cNOS)并呈Ca2+依賴性。相反,iNOS為誘導(dǎo)性酶并且不依賴Ca2+。當(dāng)受到細(xì)菌內(nèi)毒素或炎癥因子如腫瘤壞死因子α(TNFα)、白介素-1β(IL-β)的作用后,iNOS可以通過(guò)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF—κB)系統(tǒng)與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子和轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)的激活在多種細(xì)胞上表達(dá),產(chǎn)生大量的NO,影響心臟功能。
　　 本項(xiàng)研究對(duì)NF—κB

5、和iNOS在膿毒癥大鼠心肌細(xì)胞的表達(dá)進(jìn)行了觀察,同時(shí)探討了辛伐他汀對(duì)其表達(dá)的影響,以及他汀類藥物的心肌保護(hù)性作用。
　　 方法:雌性Wistar大鼠30只體重250—270克。隨機(jī)分為三組(每組10只):正常組(N組),盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)組(CLP組)和辛伐他汀組(S組)。處理方法:①S組:喂養(yǎng)辛伐他汀20mg/kg每天一次共兩周。②兩周后S組與CLP組大鼠行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)。⑧術(shù)后48小時(shí)取各組大鼠心肌組織制成石蠟切片,采用HE染色

6、和免疫組織化學(xué)染色的方法檢測(cè)心肌纖維iNOS和NF-κB的蛋白表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)及Wilcoxon秩和檢驗(yàn)的方法進(jìn)行,應(yīng)用SAS8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.大鼠的一般情況:CLP組大鼠術(shù)后表現(xiàn)出無(wú)活力,反應(yīng)差,發(fā)紺,立毛和呼吸急促的特點(diǎn)。打開(kāi)腹腔后可見(jiàn)血性腹水,可聞及惡臭味,并發(fā)現(xiàn)部分大鼠腸管水腫,盲腸發(fā)黑。相比之下,S組大鼠表現(xiàn)較輕。
　　 2.

7、HE染色結(jié)果:N組大鼠心肌纖維結(jié)構(gòu)正常。CLP組大鼠心肌纖維水腫,疏松,間質(zhì)充血水腫。而S組心肌的組織病理學(xué)改變較CLP組輕。
　　 3.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:①N組大鼠心肌細(xì)胞iNOS與NF—κB蛋白表達(dá)微量。②CLP組大鼠心肌細(xì)胞iNOS與NF—κB蛋白表達(dá)于術(shù)后48小時(shí)較N組明顯增加(P<0.05)。③S組大鼠心肌細(xì)胞iNOS與NF—κB蛋白表達(dá)與CLP組相比明顯減弱(P<0.05),與N組相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。