煙草青枯病抗性早期鑒定方法和遺傳基礎(chǔ)研究.pdf

1、煙草（Nicotianatabacum L.）是重要的經(jīng)濟作物，也是重要的模式植物。煙草青枯病是煙草生產(chǎn)中危害最大的病害之一。煙草青枯病屬土傳細菌性病害，由青枯雷爾氏菌引起，主要在我國南方各大煙區(qū)流行，但有向北發(fā)展的趨勢。利用抗病基因進行遺傳改良，是防治煙草青枯病的有效途徑。本論文對煙草青枯病抗性的早期鑒定方法和遺傳基礎(chǔ)進行了研究，以期為煙草青枯病抗性育種提供技術(shù)和理論基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：
　?。?）針對本試驗室在煙草17號染色體

2、上已經(jīng)定位的1個青枯病抗性主效QTLqBWR17a。本研究選擇與其相距4cM之內(nèi)的6個SSR標記，對23個煙草品種（系）進行基因型分析，同時對這些品種（系）的青枯病抗性進行田間鑒定。最終篩選出2個能在各個品種（系）中擴增出清晰條帶的SSR標記，其中PT51333在抗病品種（系）中的帶型均與抗病對照巖煙97一致，在感病品種（系）中的帶型均與感病對照 CB-1一致，而在中抗品種（系）中則呈現(xiàn)第三種帶型。運用 T測驗進行關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，含有PT

3、51333抗性帶型的品種（系）與非抗性帶型的品種田間病情指數(shù)差異極顯著，該結(jié)果驗證了該主效QTL在種質(zhì)資源中的可靠性。
　　（2）從田間青枯病抗性鑒定的煙草品種（系）中挑選出13份材料進行苗期抗性鑒定。結(jié)果表明，采用沙培的方法，在5葉期時用106 cfu/ml菌液澆灌，能在25天內(nèi)分辨出不同青枯病抗性的煙草品種，與田間鑒定結(jié)果高度相關(guān)，說明用此方法鑒定煙草苗期青枯病抗性是可靠的。
　　（3）以青枯病抗病品種D101和感病品種

4、長脖黃（CBH）的幼苗為材料，用青枯菌懸浮液浸根，用高壓滅菌的青枯菌懸浮液做對照，設置3個生物學重復。處理3h后取根部提取RNA，進行轉(zhuǎn)錄組測序。在D101和CBH中分別檢測到73和519個差異表達基因，其中上調(diào)基因分別為55和304個，兩品種間相同27個；下調(diào)基因為18和215個，兩品種間相同4個。CBH的差異表達基因數(shù)量明顯較多，這與其浸根3h時已表現(xiàn)明顯癥狀的事實相吻合。GO和KEGG分析表明，兩品種差異表達基因富集的GO條目和代