腸細(xì)胞膜受體LRRC19對腸道菌群及相關(guān)疾病的作用初探.pdf

1、LRR蛋白家族許多成員如TLRs是存在于生物體內(nèi)的一類重要的模式識別受體，表達(dá)在腸上皮細(xì)胞的TLRs能夠調(diào)節(jié)腸道菌群、腸上皮細(xì)胞功能和腸道免疫反應(yīng)，進(jìn)而影響腸道內(nèi)環(huán)境，在腸道相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用。LRRC19是我們最近通過生物信息學(xué)和現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)鑒定的一個LRR(Leucine-rich repeat)蛋白家族成員中的一個新受體，屬于跨膜蛋白，其胞外區(qū)結(jié)構(gòu)與Toll蛋白樣受體（Toll-like receptors

2、，TLRs）胞外區(qū)序列相類似，能夠在腸上皮細(xì)胞表達(dá)，在鼠與人之間高度保守。本文主要通過調(diào)查LRRC19基因敲除后小鼠腸道菌群、腸上皮細(xì)胞功能及腸免疫細(xì)胞群的改變，來研究LRRC19對腸道內(nèi)環(huán)境的調(diào)節(jié)，最終探討LRRC19引起腸道內(nèi)環(huán)境的變化對腸道相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展帶來的影響。
　　 主要結(jié)果:
　　 LRRC19參與調(diào)節(jié)腸道菌群的平衡。1）LRRC19調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌菌群。我們運用Real-time PCR技術(shù)和細(xì)菌16S r

3、DNA可變區(qū)測序技術(shù)檢測小鼠腸道菌群發(fā)現(xiàn)敲除LRRC19基因后小鼠腸道菌群發(fā)生了變化，具體表現(xiàn)為厚壁菌門細(xì)菌數(shù)量減少，擬桿菌門細(xì)菌數(shù)量增加;乳桿菌目細(xì)菌和梭菌目細(xì)菌數(shù)量減少;乳酸桿菌數(shù)量減少;2）LRRC19影響腸上皮細(xì)胞的殺菌能力。分離腸上皮細(xì)胞做殺菌實驗顯示LRRC19基因敲除后小鼠腸上皮細(xì)胞的殺菌能力下降;3）LRRC19調(diào)劑腸殺菌物質(zhì)的分泌。來自Real-time PCR和基因表達(dá)譜芯片的結(jié)果顯示LRRC19基因敲除后腸上皮細(xì)胞

4、分泌抗菌肽的功能受影響，腸上皮細(xì)胞分泌RegⅢγ減少，結(jié)腸組織中Reg3a、Reg3b、Reg3g、Reg4、granzyme基因表達(dá)下降。
　　 LRRC19影響腸道相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展。1）LRRC19影響腸炎的發(fā)生與發(fā)展。腸道感染模型和結(jié)腸炎模型顯示LRRC19在識別病原微生物，抵抗感染和促進(jìn)腸道炎癥發(fā)生的過程中發(fā)揮作用。2）LRRC19對腸免疫有明顯調(diào)控作用。流式分析腸系膜淋巴結(jié)和派伊爾結(jié)的細(xì)胞群顯示LRRC19基因敲除后

5、，CD19+B220+細(xì)胞群數(shù)量增多，CD4+Foxp3+和CD4+IL-17細(xì)胞群數(shù)量減少;3）LRRC19對機(jī)體代謝有潛在調(diào)控作用。長期觀察鼠模型顯示野生型小鼠相比LRRC19基因敲除鼠慢性炎癥的發(fā)生幾率高，并且存活率低，生化指標(biāo)檢測，LRRC19基因敲除鼠血脂低，血糖高。
　　 主要結(jié)論:
　　 LRRC19基因敲除后導(dǎo)致腸道內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變而且對腸道相關(guān)疾病的發(fā)生和發(fā)展有潛在的影響。本文的研究將會為炎癥性腸道疾病、