血吸蟲蟲卵高表達(dá)蛋白SjE16在固有免疫中的作用研究.pdf

1、蟲卵是血吸蟲的主要致病因素。日本血吸蟲蟲卵發(fā)育成熟的過程中產(chǎn)生大量的可溶性抗原，急性期誘導(dǎo)以粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞為主的免疫細(xì)胞趨化，形成以蟲卵為中心的肉芽腫；慢性期肉芽腫發(fā)生纖維化，進(jìn)而引起嚴(yán)重的并發(fā)癥。以往對血吸蟲蟲卵的相關(guān)研究大多以血吸蟲蟲卵可溶性抗原（soluble egg antigens，SEA）為基礎(chǔ)，但SEA成分復(fù)雜，難以尋找其中關(guān)鍵的致病分子。同時對血吸蟲致病機(jī)制的研究大多集中于蟲卵與機(jī)體適應(yīng)性免疫之間的相互作用，對其與固有

2、免疫的相互作用研究較少。蟲卵肉芽腫形成的過程中，粒細(xì)胞與巨噬細(xì)胞等固有免疫細(xì)胞的趨化與活化發(fā)揮著重要的作用，因此研究蟲卵抗原與中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的相互作用對于深入了解蟲卵的致病機(jī)制至關(guān)重要。
　　本研究中，我們以蟲卵中特異性高表達(dá)的SjE16分子為研究對象，通過畢式酵母真核表達(dá)系統(tǒng)和大腸埃希菌原核表達(dá)系統(tǒng)對該蛋白分別進(jìn)行了表達(dá)與純化，ELISA對重組蛋白的免疫反應(yīng)性進(jìn)行了鑒定。通過制備SjE16的小鼠多克隆抗體，抽提蟲卵及成蟲R

3、NA，分別從蛋白和基因水平檢測了其在蟲卵中的特異性分布。在SjE16對宿主固有免疫反應(yīng)的作用研究中，我們應(yīng)用小鼠皮下氣囊模型對SjE16在體內(nèi)誘導(dǎo)機(jī)體炎癥反應(yīng)的作用進(jìn)行了探索。并以小鼠原代中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞為細(xì)胞模型，在體外研究了SjE16對固有免疫細(xì)胞移行與細(xì)胞因子分泌功能的影響，對其可能的信號通路進(jìn)行了初步探索。實驗結(jié)果顯示，我們通過真核與原核表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)純化了SjE16目的蛋白，重組蛋白具有很好的免疫反應(yīng)性與免疫原性。SjE