健脾疏肝降脂方對非酒精性脂肪肝小鼠血脂及肝組織病理學的影響.pdf

1、目的：觀察健脾疏肝降脂方對高脂肪飲食和藥物引起的非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型小鼠的影響，并探討該方的作用機制，為臨床應(yīng)用推廣提供有力的證據(jù)。
　　方法：72只SPF級昆明種小鼠，給予全價營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)1周后，隨機分為6組，即正常組，模型對照組，殼脂膠囊組，健脾疏肝降脂方高、中、低劑量組，每組12只，雌雄各半。正常組給予普通飼料，其它各組采用喂高脂飼料和藥物誘導建立 NAFLD小鼠模型。同時，除正常組和模型對照組外，各治療組給予健

2、脾疏肝降脂方水煎液或殼脂膠囊水溶液灌服，正常組和模型組給予等體積的超凈水灌服，各組小鼠（除正常組外）在下腹部給予皮下注射10％的CCl4食用油溶液，劑量為0.1mL/10g，每周2次，共持續(xù)6周。最后一次治療后禁食12h，給予10%水合氯醛溶液4mL/kg腹腔內(nèi)注射麻醉，麻醉成功后，給予腹主動脈穿刺取血，將血樣低溫下離心分離，檢測血清甘油三酯（TG）、膽固醇（TC）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、高密度脂蛋白

3、（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）水平或反應(yīng)性變化及肝組織游離脂肪酸（FFA）的含量。處死小鼠后，快速剖取肝臟稱其濕重，計算肝指數(shù)，用0.9%氯化鈉溶液沖洗，在肝臟左葉同位置處剪一小塊大小適宜的肝組織置于4%多聚甲醛液中固定，給予肝組織石蠟包埋，切片，HE染色，觀察組織病理學變化。
　　結(jié)果：①模型組與正常組比較，其小鼠肝指數(shù)、肝濕重及血清 TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均明顯升高，有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01）；②

4、與正常組相比，健脾疏肝降脂方高、中劑量組肝指數(shù)、肝濕重、TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；③與模型組對比，健脾疏肝降脂方高、中、低劑量組和殼脂膠囊組各項指標均明顯降低或者減輕，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；④在改善各項指標方面，健脾疏肝降脂方高、中劑量組明顯優(yōu)于殼脂膠囊組及低劑量組，無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；⑤光鏡下可見：肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，中央靜脈周圍肝細胞呈輻射形式排列，形態(tài)一致，大小均勻，未

5、見脂肪變性及壞死、炎性細胞侵潤；顯微鏡下見，模型對照組小鼠肝小葉構(gòu)造不清楚，肝小葉出現(xiàn)明顯損害，肝細胞體積腫脹明顯，肝細胞水腫明顯，可見肝組織呈彌漫性脂肪變，核增大，細胞索無規(guī)律排列，可見由兩個及兩個以上破裂的肝細胞相互融合，其中又以小葉中央病變嚴重，大量炎性細胞入侵，有時可見凋亡小體；各治療組及殼脂膠囊組小鼠肝細胞脂肪變均有不同程度的改善趨勢，治療高、中劑量組和殼脂膠囊組效果好于低劑量組；⑥電鏡下可見：正常組肝組織中的超微結(jié)構(gòu)肝細胞內(nèi)

6、有著豐富的線粒體，線粒體嵴較為豐富，但也可見有少數(shù)的脂滴存在，模型組小鼠肝組織中的超微結(jié)構(gòu)肝細胞內(nèi)有著豐富的線粒體，線粒體嵴幾乎消失，但也可見有大量的脂滴存在，和大量的膠原纖維存在，各治療組及殼脂膠囊組小鼠肝細胞脂肪變均有不同程度的改善趨勢，治療高、中劑量組和殼脂膠囊組效果好于低劑量組。
　　結(jié)論：健脾疏肝降脂方對NAFLD小鼠的肝功能、血脂TG、TC、HDL、LDL及肝組織FFA有良好的調(diào)節(jié)作用，本方能通過促進 NAFLD小鼠病