顱腦創(chuàng)傷后自身免疫與繼發(fā)性損害相關(guān)性研究.pdf

1、目的：研究重型顱腦創(chuàng)傷患者血清抗腦抗體變化趨勢(shì)；通過新西蘭大白兔腦皮層組織注射抗腦抗體并行注射點(diǎn)周圍組織細(xì)胞凋亡以及谷氨酸表達(dá)檢測(cè)，研究抗腦抗體對(duì)腦組織的損害作用；建立兔腦單側(cè)重型液壓沖擊創(chuàng)傷模型，通過給予免疫抑制治療，探討免疫抑制治療對(duì)于創(chuàng)傷后腦組織的保護(hù)作用。 方法：研究共分為三部分，第一部分，用ELISA法檢測(cè)49例顱腦創(chuàng)傷患者和47例健康人的血清抗腦抗體濃度。所有顱腦創(chuàng)傷患者分別于傷后第3天、7天、2周、3周、1個(gè)月、2

2、個(gè)月及6個(gè)月，9個(gè)月等時(shí)間點(diǎn)，采集空腹肘靜脈血4ml。分離血清，置-20℃保存。對(duì)照組樣本采集無時(shí)間限定。收齊標(biāo)本后用ELISA法檢測(cè)抗腦抗體的濃度。第二部分，24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為3組，抗腦抗體組、免疫抑制組和生理鹽水對(duì)照組，新西蘭大白兔大腦皮層微量注射抗腦抗體，對(duì)照組于相同部位注射等量生理鹽水，一個(gè)月后處死新西蘭大白兔，取注射點(diǎn)周圍皮層組織，用免疫組織化學(xué)方法，測(cè)定其谷氨酸表達(dá)，用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法測(cè)定

3、其細(xì)胞凋亡情況。第三部分，24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為3組，即創(chuàng)傷組、免疫抑制組、假手術(shù)組，建立兔腦單側(cè)重型液壓沖擊創(chuàng)傷模型，免疫抑制組隔日口服環(huán)孢素A50mg，收集創(chuàng)傷前2小時(shí)及創(chuàng)傷后3天、7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天各時(shí)間點(diǎn)血清標(biāo)本，用放射免疫法檢測(cè)血清抗腦抗體的濃度，所有新西蘭大白兔于傷后50天處死，取創(chuàng)傷周圍皮層組織，用免疫組織化學(xué)方法，測(cè)定其谷氨酸表達(dá)，用TUNEL法測(cè)定其細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：健康人

4、群血清中有少量抗腦抗體存在，顱腦創(chuàng)傷組患者血清抗腦抗體濃度較健康人群明顯增高，并且可以持續(xù)較長時(shí)間；新西蘭大白兔腦皮層組織注射抗腦抗體1個(gè)月后，其谷氨酸表達(dá)以及凋亡均明顯高于對(duì)照組和免疫抑制組，三組兩兩比較有顯著性差異；在對(duì)新西蘭大白兔顱腦予以單側(cè)液壓打擊后，免疫抑制劑組新西蘭大白兔體內(nèi)抗腦抗體峰值的出現(xiàn)較顱腦創(chuàng)傷組推遲，而且其峰值也比創(chuàng)傷組低；三組新西蘭大白兔血清中抗腦抗體濃度兩兩比較均有顯著性差異(P<0.05)，免疫抑制組新西蘭大

5、白兔創(chuàng)傷周圍腦組織谷氨酸表達(dá)以及凋亡計(jì)數(shù)明顯低于顱腦創(chuàng)傷組，兩組數(shù)值比較亦有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論：1.健康人群血清中存在少量抗腦抗體；2.顱腦創(chuàng)傷后，血清中抗腦抗體與正常狀態(tài)相比將有明顯升高；3.顱腦創(chuàng)傷后體內(nèi)升高的抗腦抗體導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡和谷氨酸表達(dá)增高，顱腦創(chuàng)傷可能具有自身免疫性疾病的特點(diǎn)，自身免疫損害可能是顱腦創(chuàng)傷后繼發(fā)性腦損傷的重要原因；4.顱腦創(chuàng)傷后，免疫抑制治療通過降低組織免疫反應(yīng)，可以降低自身抗腦抗體