超高分子聚乙烯顆粒對(duì)成骨細(xì)胞代謝及其細(xì)胞因子影響的研究.pdf

1、目的：關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體磨損顆粒引起周圍骨質(zhì)溶解是無(wú)菌性松動(dòng)的主要原因，然而其確切機(jī)制尚未清楚。本試驗(yàn)建立小鼠胚胎成骨細(xì)胞和UHMWPE顆粒的體外聯(lián)合培養(yǎng)的新模型，研究UHMWPE顆粒對(duì)體外培養(yǎng)小鼠胚胎成骨細(xì)胞增殖活性及其細(xì)胞因子分泌的影響，深入探索關(guān)節(jié)置換術(shù)后關(guān)節(jié)無(wú)菌性松動(dòng)機(jī)制。 方法：向裝滿培養(yǎng)基含有貼壁成骨細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中加入U(xiǎn)HMWPE顆粒，封閉倒置培養(yǎng)瓶，顆粒漂浮至貼壁細(xì)胞層，試驗(yàn)分為空白對(duì)照組和不同粒徑的UHMWPE顆粒

2、干預(yù)組，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)分析各組細(xì)胞調(diào)亡情況；分別在共培養(yǎng)的第三、五、七天時(shí)觀察細(xì)胞ALP活性(λ=490nm)；半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Western blotting法檢測(cè)Cbfα1、RANKL、OPG在mRNA水平和蛋白水平上的表達(dá)情況。 結(jié)果：成功建立成骨細(xì)胞與UHMWPE顆粒體外聯(lián)合培養(yǎng)的新模型，封閉條件下細(xì)胞正常生長(zhǎng)可達(dá)十天：試驗(yàn)顯示UHWPE顆粒不影響細(xì)胞增殖活性，對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性作用：粒徑小于2

3、0.18μm的顆粒干預(yù)組較空白對(duì)照組ALP活性差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；粒徑<20.18μm的UHMWPE顆粒隨劑量和時(shí)間增加而上調(diào)成骨細(xì)胞Cbf-α1、RANKL、OPG的mRNA及蛋白表達(dá)，RANKL/OPG比率隨著UHMWPE顆粒刺激的劑量和時(shí)間增加而增高。 結(jié)論：UHMWPE顆粒可以獨(dú)立、直接影響成骨細(xì)胞的活性和相關(guān)因子的分泌。UHMWPE顆粒通過(guò)調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞RANKL、OPG的分泌及兩者比值改變間接地調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞活性，從而影