Glycoborinine誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的細(xì)胞信號(hào)途徑研究.pdf

1、五葉山小桔屬于蕓香科。在中國(guó)和印度傳統(tǒng)醫(yī)藥中，五葉山小桔被廣泛用于治療發(fā)燒、感冒、麻木和其他疾病?，F(xiàn)代臨床研究表明，五葉山小桔有保肝活性。但是，其活性的有效成分尚不清楚。Glycoborinine(GB)是從五葉山小桔中分離出來(lái)的主要生物堿之一，屬于咔唑生物堿。之前的研究發(fā)現(xiàn)：GB具有光敏抗菌和抗癌活性。但是，其抗癌活性的機(jī)制并不清楚。
　　本次研究的目的是探索GB抗癌的細(xì)胞信號(hào)途徑。以HepG2作為細(xì)胞模型，通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、Ho

2、chest33258染色實(shí)驗(yàn)、PI染色實(shí)驗(yàn)和Annexin V-FITC和PI染色實(shí)驗(yàn)分析GB對(duì)HepG2細(xì)胞的存活率、細(xì)胞形態(tài)學(xué)、核染色質(zhì)形態(tài)學(xué)、sub-G1和凋亡的影響。通過(guò)研究GB對(duì)HepG2的ROS水平和線粒體膜電位的影響，以及對(duì)Bax、Bcl-2、細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞色素C、caspase-3和PARP表達(dá)量的影響等，證實(shí)GB通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡。
　　MTT實(shí)驗(yàn)顯示，GB抑制HepG2細(xì)胞增殖。在48 h，GB誘

3、導(dǎo)細(xì)胞死亡50％的抑制濃度為39.7μM。
　　Hochest33258的染色實(shí)驗(yàn)表明，GB處理組細(xì)胞染色質(zhì)發(fā)生凝聚。PI染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，GB處理誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞形成凋亡峰（sub-G1）。Annexin V-FITC和PI的染色結(jié)果表明，GB可以誘導(dǎo)HepG2凋亡。
　　進(jìn)一步研究顯示，GB處理可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的ROS水平增高。同時(shí)，GB處理可誘導(dǎo) HepG2線粒體膜電位下降。免疫印跡研究結(jié)果顯示，GB可誘導(dǎo) He