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文檔簡介
1、由于呼吸道具有巨大的吸收面積,上皮細胞豐富且肺上皮細胞極薄并有良好的通透性,核酸等生物大分子通過霧化能夠在呼吸道局部達到較高的濃度,并得到有效表達.通過霧化方式進行基因轉(zhuǎn)移已成為呼吸道基因治療和免疫的一種有效途徑.我們采用TK-2型氣溶膠發(fā)生器采用合適的發(fā)生條件可以保證相當一部分裸質(zhì)粒DNA發(fā)生1小時后仍然保持其體外細胞轉(zhuǎn)染和細菌轉(zhuǎn)化的活性.氣溶膠粒子粒譜分析儀的粒譜檢測結果表明,質(zhì)粒氣溶膠的數(shù)量中值直徑(NMD)約為1μm,說明大部分
2、氣溶膠粒子能夠到達呼吸道深部.在此基礎上,將甲型流感病毒A/PR/8/34毒株血凝素基因的真核表達構建質(zhì)鑿pCAGGSP7/HA經(jīng)試劑盒大量提取并純化后,采用霧化吸入等方法免疫BALB/c小鼠.免疫組化法顯示,除了陰性對照組,在各組均可以看到肺組織中質(zhì)粒的表達情況,但程度不同,表明在合適的氣溶膠發(fā)生條件下裸質(zhì)粒能夠轉(zhuǎn)染小鼠呼吸道;用ELISA法檢測不同方法免疫后,霧化組小鼠的血清IgG抗體和肺灌洗液IgA抗體的效價均可以達到一定的水平;
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