非小細(xì)胞肺癌間質(zhì)炎性細(xì)胞TAM、MC計數(shù)與趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1的表達(dá)及意義.pdf

1、非小細(xì)胞肺癌(Non-Small-CellLungCancer,NSCLC)是人類主要的惡性腫瘤之一，具有較高的侵襲性和較差的預(yù)后，而惡性腫瘤發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移的一個重要的條件是腫瘤的血管生成。近年來，腫瘤間質(zhì)中浸潤的炎性細(xì)胞以及趨化因子在腫瘤血管生成中的地位愈加得到人們的肯定。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumorassociatedmacrophage，TAMs)和肥大細(xì)胞(Mastcell，MCs)等炎性細(xì)胞與惡性腫瘤的血管生成、浸潤、轉(zhuǎn)移和

2、預(yù)后有著一定的關(guān)系，可能與其自分泌或旁分泌的多種細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)和介導(dǎo)有關(guān)，趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1在介導(dǎo)局部免疫的同時，其促進(jìn)腫瘤血管生成的作用也日漸為人們所重視。腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)炎性細(xì)胞的相互作用，既促進(jìn)腫瘤新血管的生成，也構(gòu)建腫瘤得以生長的局部環(huán)境。 第一章癌間質(zhì)炎性細(xì)胞TAM、MC及趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1對非小細(xì)胞肺癌血管生成的作用和意義目的測定非小細(xì)胞肺癌MVC和間質(zhì)中TAMs、MCs計數(shù)

3、以及趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1mRNA的表達(dá)，探討其表達(dá)的意義和三者間相互關(guān)系，及其對非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征的意義。 方法1.用免疫組化ABC法測定40例非小細(xì)胞肺癌和10例正常肺組織石蠟切片標(biāo)本中MV和TAMs、MCs計數(shù)。 2.以原位雜交法檢測上述標(biāo)本中IL-8、MCP-1、MIP-1mRNA的表達(dá)情況。 3.分析MV、TAMs、MCs計數(shù)和趨化因子陽性表達(dá)之間的相互關(guān)系，以及在非小細(xì)胞肺癌臨

4、床病理變化中的意義。 結(jié)果40例非小細(xì)胞肺癌組織中MV，TAMs和MCs計數(shù)，以及IL-8、MCP-1、MIP-1mRNA的陽性系數(shù)均值分別對應(yīng)為64.40±16.00，29.36±13.56和33.90±14.47，以及1.68±1.16，1.90±1.15，1.40±1.24，明顯高于10例肺組織對照組中相對應(yīng)的28.30±3.65，10.78±3.39和10.56±3.30，以及0.40±0.70，0.30±0.67，0.

5、20±0.63，差異有顯著性，并且隨著非小細(xì)胞肺癌臨床病理的改變而出現(xiàn)相應(yīng)的變化，表現(xiàn)為T3組大于T2或T1組，Ⅲ期組大于Ⅱ期組大于Ⅰ期組，有淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組大于無轉(zhuǎn)移組，生存時間≤3年組大于生存時間＞3年組。MV、TAMs、MCs計數(shù)和IL-8、MCP-1、MIP-1陽性表達(dá)之間以及它們相互之間也存在著密切的正相關(guān)。 結(jié)論非小細(xì)胞肺癌MVC和間質(zhì)炎性細(xì)胞TAMs、MCs計數(shù)與趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1mRNA的

6、陽性表達(dá)三者之間均存在著明顯一致的相關(guān)性，并隨著腫瘤的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移、生存時間的降低而有相應(yīng)增高的趨勢，提示非小細(xì)胞肺癌間質(zhì)炎性細(xì)胞TAM、MC和趨化因子IL-8、MCP-1、MIP-1能夠相互協(xié)同，共同促進(jìn)腫瘤血管生成。 第二章共培養(yǎng)NSCLC細(xì)胞株A549和TAM細(xì)胞株U937對IL-8促表達(dá)和分泌的作用 目的觀察TAM細(xì)胞U937和NSCLC細(xì)胞A549在體外不同的共培養(yǎng)條件下，對趨化因子IL-8促表達(dá)和分泌的作用。

7、 方法1.在A549細(xì)胞濃度1.0×105/ml條件下，觀察其與不同濃度的U937細(xì)胞共培養(yǎng)24小時的生長情況，并用原位雜交的方法分別測定在U937細(xì)胞濃度為0、1、2、4、8(×105/m1)時A549細(xì)胞中IL-8mRNA的陽性表達(dá)。 2.在A549細(xì)胞和U937細(xì)胞濃度均為1.0×105/ml的共培養(yǎng)條件下，用ELISA法分別測定0、4、8、16、24、48小時時段共培養(yǎng)物上清液中IL-8的含量。 結(jié)果在共培

8、養(yǎng)24小時的條件下，隨著U937細(xì)胞濃度的逐漸增高，癌細(xì)胞A549中IL-8mRNA表達(dá)的陽性系數(shù)均值也相應(yīng)地增高，明顯高于U937細(xì)胞濃度為0×105/ml的共培養(yǎng)組。 共培養(yǎng)物上清液中IL-8的含量隨共培養(yǎng)時間的延長而增加，在48小時達(dá)到最高，明顯高于共培養(yǎng)0小時時段以及對照組各時段，IL-8在后兩者中也有一定的自分泌。 結(jié)論TAM細(xì)胞U937和NSCLC細(xì)胞A549共培養(yǎng)能夠促進(jìn)癌細(xì)胞IL-8mRNA的陽性表達(dá)和共