KiSS-1、MMP-2和MVD在不同食管病變組織中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的
　　 食管癌是最常見的惡性腫瘤之一,它嚴(yán)重威脅著人類的生命和健康。食管癌的高發(fā)地區(qū)主要在我國的河南等省份,以往的消化道腫瘤死亡回顧調(diào)查顯示,每年因食管癌而死亡的人數(shù)大約有20萬人,位居第4位。引起其死亡的重要因?yàn)橹痪褪墙櫤瓦h(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,因此尋找抑制食管癌浸潤轉(zhuǎn)移機(jī)制,是目前腫瘤學(xué)研究的熱點(diǎn)課題之一。
　　 腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多步驟、多階段、多因素和多基因參與的過程。惡性腫瘤增殖失控、侵襲和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)是腫瘤轉(zhuǎn)移相

2、關(guān)基因的活化和腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的失活,KiSS-1及MMPs等的突變和缺失與多數(shù)惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。
　　 KiSS-1是1996年克隆出的一個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因。研究證明,KiSS-1的表達(dá)缺失與多種惡性腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān)。近年來,已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道了KiSS-1與多種惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),如乳癌、胃癌、卵巢癌和胰腺癌等。該基因表達(dá)的降低與缺失與腫瘤的浸澗深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),其作用機(jī)制可能與抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(m

3、atrix metalloproteniases,MMPs)的活性及腫瘤細(xì)胞的移行能力有關(guān)。
　　 MMPs是一種能降解細(xì)胞外基質(zhì)的所有成分的鋅離子依賴性內(nèi)肽酶,MMPs中降解基底膜最重要的蛋白酶之一是基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2),又稱明膠酶A,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ及X型膠原和彈性纖維,從而降解細(xì)胞外基質(zhì)及促進(jìn)腫瘤新生血管的生成。研究表明,MMP-2在胃癌及肺癌等多種惡性腫瘤

4、的浸潤轉(zhuǎn)移中扮演著重要角色。KiSS-1和MMP-2可能通過調(diào)控腫瘤血管的生成而調(diào)節(jié)腫瘤生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。
　　 新生血管的形成在實(shí)體腫瘤的生長轉(zhuǎn)移中起重要作用,研究其血管改變具有重要的臨床意義。目前惡性腫瘤血管生成的數(shù)量通過測定微血管密度(microvessel density,MVD)進(jìn)行評估。迄今為止,有關(guān)在食管鱗癌中KiSS-1、MMP-2及MVD的表達(dá)及其三者與食管鱗癌浸潤轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究,除本課題組前期發(fā)表的相關(guān)文章外

5、,國內(nèi)外尚未見其他文獻(xiàn)報(bào)道。
　　 為深入探討KiSS-1、MMP-2基因及MVD與食管鱗癌發(fā)生發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系,尋求檢測食管鱗癌發(fā)生發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移的早期指標(biāo),進(jìn)而尋找可能抑制食管鱗癌發(fā)生發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移的有效方法。本研究采用免疫組化SP法檢測了62例食管鱗癌、31例癌旁不典型增生組織及62例正常食管黏膜組織中KiSS-1及MMP-2蛋白的表達(dá)水平并探討了其臨床病理意義；同時(shí)用抗CD34抗體檢測了62例食管鱗癌組織中的MVD,

6、探討KiSS-1、MMP-2及MVD的相關(guān)性,揭示KiSS-1及MMP-2與食管鱗癌浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系。從而為進(jìn)一步探討食管鱗癌發(fā)生發(fā)展、浸潤轉(zhuǎn)移機(jī)制及尋找抑制食管鱗癌發(fā)生發(fā)展的可能途徑提供理論基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 1.采用免疫組織化學(xué)SP法檢測62例食管鱗癌組織、31例癌旁不典型增生組織及62例正常食管黏膜組織中KiSS-1蛋白的表達(dá)情況,并探討其臨床病理學(xué)意義。
　　 2.采用免疫組織化學(xué)SP法檢測62例

7、食管鱗癌組織、31例癌旁不典型增生組織及62例正常食管黏膜組織中MMP-2蛋白的表達(dá)情況,并探討其臨床病理學(xué)意義；
　　 3.采用免疫組織化學(xué)的方法檢測62例食管鱗癌組織CD34蛋白表達(dá)情況,探討MVD分布的臨床病理學(xué)意義。
　　 4.通過檢測KiSS-1、MMP-2與CD34蛋白的表達(dá),探討KiSS-1、MMP-2和MVD分布的相關(guān)性及其意義。
　　 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS10.O軟件處理,采用x2僉驗(yàn)、

8、t檢驗(yàn)和方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1.正常食管黏膜組織、癌旁不典型增生組織及食管鱗癌組織中KiSS-1蛋白的表達(dá)率分別是90.3％(56/62)、67.7％(21/31)及56.5％(35/62),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；浸潤深度達(dá)淺肌層者及深肌層者KiSS-1蛋白的陽性表達(dá)率分別為100％(7/7)和50.9％(28/55),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05):KiSS-1

9、蛋白在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中的陽性表達(dá)率為35.0％(7/20),明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織66.7％(28/42)；組織學(xué)分級為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級的食管鱗癌組織中KiSS-1蛋白的陽性表達(dá)率分別為66.7％(10/15)、56.0％(14/25)、50.0％(11/22),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.正常食管黏膜組織、癌旁不典型增生組織及食管鱗癌組織中MMP-2蛋白的表達(dá)率分別是22.6％(14/62)、54.8％(

10、17/31)及71.0％(44/62),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；組織學(xué)分級為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級的食管鱗癌組織中MMP-2蛋白的陽性表達(dá)率分別為46.7％(7/15)、72.O％(18/25)、86.4％(19/22),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；淺肌層浸潤組及深肌層浸潤癌組織中MMP-2蛋白的陽性表達(dá)率分別為28.6％(2/7)和76.4％(42/55),且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；MMP-2蛋白在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中

11、的陽性表達(dá)率為90.0％(18/20),明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織61.9％(26/42)。
　　 3.62例食管鱗癌組織中平均MVD值為39.4±9.5,其中浸潤深度達(dá)淺肌層者及深肌層者的MVD值分別為28.1±8.1及40.8±9.1,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；組織學(xué)分級為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級的食管鱗癌組織中平均MVD值分別為32.3±4.9、38.6±8.3、45.1±10.6,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；伴

12、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌組織的MVD值為51.2±6.1,明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織的MVD值33.8±5.0(P＜0.05)。
　　 4.食管鱗癌組織中的KiSS-1及MMP-2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(rs-0.418,P＜0.05)；KiSS-1蛋白表達(dá)陰性病例的MVD值為47.8±7.8,比表達(dá)陽性病例的MVD值32.9±5.0顯著增高(P＜0.05)；MMP-2蛋白表達(dá)陽性者的MVD值41.0±3.2明顯高于MMP-2蛋白表達(dá)

13、陰性者的MVD值36.3±3.8。
　　 結(jié)論：
　　 1.KiSS-1蛋白在正常食管黏膜組織、癌旁不典型增生組織及食管鱗癌組織中的陽性表達(dá)率依次降低,并與食管鱗癌的浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),提示KiSS-1的表達(dá)缺失或降低可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
　　 2.MMP-2蛋白的陽性表達(dá)率在正常食管黏膜組織、癌旁不典型增生組織及食管鱗癌組織中顯著增高,并與食管鱗癌的分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

14、移密切相關(guān)。提示MMP-2可能參與了食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移的過程。
　　 3.食管鱗癌組織中的MVD值與腫瘤的組織學(xué)分級、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),提示:MVD與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān),可作為腫瘤預(yù)后判斷的一項(xiàng)指標(biāo),為進(jìn)一步通過阻斷腫瘤微血管生成而治療腫瘤提供了理論基礎(chǔ)。
　　 4.食管鱗癌組織中KiSS-1蛋白表達(dá)陰性者M(jìn)VD值顯著高于陽性者,而MMP-2蛋白的表達(dá)陽性的MVD值顯著高于表達(dá)陰性者,且KiSS-