氫飽和生理鹽水對大鼠急性一氧化碳中毒腦損傷的保護(hù)機(jī)制研究.pdf

1、急性一氧化碳中毒是指在短時間內(nèi)吸入過量一氧化碳（carbonmonoxide,CO）所引起的中毒。它是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)（centralnevoussystem,CNS）損傷為主的全身性疾病，是當(dāng)今發(fā)生率和死亡率最高的中毒。急性CO中毒治療不及時或者即使經(jīng)過積極治療，仍有3％～30％的患者于中毒癥狀緩解后，經(jīng)過一段時間的“假愈期”（3～240d）再次出現(xiàn)嚴(yán)重的腦損傷，稱為遲發(fā)性腦?。╠elayedneuropathologicalseque

2、lae,DNS）。目前臨床上廣泛采取高壓氧（hyperbaricoxygen,HBO）聯(lián)合其他對癥治療措施對急性CO中毒和遲發(fā)性腦損傷進(jìn)行治療。HBO治療不及時或療程不足是急性CO中毒腦損傷和DNS發(fā)生的主要臨床因素之一?；颊邚陌l(fā)生CO中毒到送往醫(yī)院進(jìn)行HBO治療的過程中病情可能加重。因此，我們需要一種安全有效、使用方便的藥物，在急性CO中毒后，作為HBO治療前和治療過程中的輔助治療手段，預(yù)防和治療急性CO中毒腦損傷。
　　氫氣（

3、hydrogen,H2）作為一種選擇性抗氧化劑得到了學(xué)者們的廣泛關(guān)注。大量研究證實，H2可用于多種與自由基損傷和氧化應(yīng)激相關(guān)的疾病。急性CO中毒腦損傷和遲發(fā)性腦病與自由基損傷、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡，以及免疫損傷等密切相關(guān)。因此，我們推測H2對急性CO中毒腦損傷具有保護(hù)作用。然而，H2與空氣的混合氣體在體積百分比超過4.6％時，有發(fā)生爆炸的危險，因此我們將H2過飽和溶解于生理鹽水中，制成氫飽和生理鹽水，研究H2對急性CO中毒腦損傷的保護(hù)作用

4、和保護(hù)機(jī)制。目前，關(guān)于H2對CO中毒腦損傷的保護(hù)作用研究主要是從抗氧化和抗炎作用的角度進(jìn)行的。本研究主要通過對氧化還原活性金屬與抗氧化能力的研究探討氫的抗氧化機(jī)制；通過對神經(jīng)元死亡方式和腦組織免疫損傷的研究探討氫的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
　　我們采用急性靜態(tài)CO吸入法建立急性CO中毒大鼠模型，通過行為學(xué)實驗觀察模型大鼠腦功能的變化；通過組織病理學(xué)方法、免疫組織化學(xué)法和免疫印跡法觀察模型大鼠腦皮質(zhì)及海馬神經(jīng)元損失情況、細(xì)胞死亡方式和免疫損傷

5、情況；通過火焰原子吸收光譜法測定氧化還原活性金屬（微量元素銅、鋅、鐵）的含量；通過化學(xué)比色法分析抗氧化能力的變化。
　　其主要結(jié)果如下：
　　(1)H2飽和生理鹽水對急性CO中毒腦損傷的保護(hù)作用
　　H2飽和生理鹽水可改善急性CO中毒所致的學(xué)習(xí)記憶能力下降和對新奇環(huán)境的適應(yīng)障礙；降低腦組織神經(jīng)元的死亡率；減輕神經(jīng)元缺血性改變的程度。
　　(2)H2飽和生理鹽水對急性CO中毒腦損傷的抗氧化作用及其與微量元素的關(guān)系<

6、br>　　H2飽和生理鹽水可提高腦組織和血清的超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平，發(fā)揮對急性CO中毒腦損傷的抗氧化作用；其抗氧化能力是通過螯合中毒大鼠腦組織內(nèi)的鐵，并維持一定的血清銅水平實現(xiàn)的。
　　(3)H2飽和生理鹽水對急性CO中毒大鼠神經(jīng)細(xì)胞死亡機(jī)制的影響
　　H2飽和生理鹽水在急性CO中毒腦損傷早期和晚期可減輕神

7、經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡；在損傷早期對細(xì)胞自噬無影響，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的再利用，在損傷晚期可抑制自噬性細(xì)胞死亡，從而保護(hù)腦組織免受急性CO中毒損傷。
　　(4)H2飽和生理鹽水對急性CO中毒大鼠腦組織免疫損傷的影響
　　急性CO中毒后，腦組織神經(jīng)元和髓鞘損傷、小膠質(zhì)細(xì)胞圍繞在損傷神經(jīng)元周圍，腦內(nèi)可見大量巨噬細(xì)胞浸潤，且巨噬細(xì)胞具有小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)特征，還可見巨噬細(xì)胞和髓磷脂堿性蛋白（myelinbasicprotein,MBP）

8、雙陽性的細(xì)胞；腦組織內(nèi)與巨噬細(xì)胞浸潤相關(guān)的細(xì)胞因子表達(dá)增加。H2飽和生理鹽水治療可使CO中毒所致的髓鞘損傷減輕、巨噬細(xì)胞和細(xì)胞因子浸潤減少。急性CO中毒腦損傷的發(fā)病過程有巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的免疫炎癥反應(yīng)參與，髓鞘損傷可能是免疫損傷的始動因素之一；H2飽和生理鹽水通過減輕腦組織免疫損傷保護(hù)腦組織。
　　總之，通過本研究證明，H2飽和生理鹽水對急性CO中毒腦損傷具有一定的保護(hù)作用。其保護(hù)機(jī)制可能與H2的抗氧化，對抗細(xì)胞壞死、凋亡和自噬，以及