大鼠CFA炎癥模型中MCP-1對(duì)疼痛產(chǎn)生及維持的作用.pdf

1、組織損傷誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎性疼痛的治療是臨床上的一個(gè)難題，對(duì)其產(chǎn)生機(jī)制的全面深入的研究是開發(fā)更為有效治療方案的重要組成部分。經(jīng)過這些年的研究積累，人們已發(fā)現(xiàn)有許多機(jī)制參與了炎性疼痛的產(chǎn)生及維持過程，細(xì)胞因子特別是趨化因子在慢性疼痛中的作用近幾年來受到了越來越多的重視，但趨化因子在炎性疼痛中發(fā)揮什么樣的作用還有待進(jìn)一步研究。我們?cè)谕耆ナ献魟?Freund's adjuvant，complete，CFA)誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎性疼痛大鼠模型(CFA炎性大

2、鼠)中發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)及其受體CCR2在DRG痛覺神經(jīng)元中的表達(dá)升高，并可直接興奮DRG痛覺神經(jīng)元；另外，已有的研究表明MCP-1的作用位點(diǎn)不僅在外周痛覺感受器，還可能作用在脊髓水平，這可能是炎性疼痛長時(shí)間維持、反復(fù)發(fā)作的重要原因，因此我們?cè)谘芯縈CP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)直接興奮外周DRG痛覺神經(jīng)元的基礎(chǔ)上，又進(jìn)一步研究了MCP-1對(duì)脊髓后角

3、膠狀質(zhì)層(substantia gelatinosa,SG)神經(jīng)元突觸傳遞過程的調(diào)節(jié)作用。我們的研究為尋找炎性疼痛的臨床治療提供了新的作用靶點(diǎn)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 一、MCP-1對(duì)CFA炎性大鼠痛覺行為的易化作用
　　 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，足底注射MCP-1能引起CFA炎性大鼠的自發(fā)性疼痛行為增強(qiáng)并能易化機(jī)械性痛覺過敏，表現(xiàn)為足底注射MCP-1后，大鼠由于疼痛產(chǎn)生的自發(fā)性后腳懸空時(shí)間增長，而

4、且在自發(fā)性疼痛行為消失后，其對(duì)機(jī)械刺激的反應(yīng)閾值降低。
　　 二、CFA炎性大鼠DRG中MCP-1及CCR2的表達(dá)量升高
　　 1.熒光實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)研究結(jié)果表明，CFA炎性大鼠DRG組織中MCP-1的mRNA表達(dá)量升高。
　　 2.Western blot技術(shù)研究結(jié)果表明，CFA炎性大鼠DRG神經(jīng)元中CCR2蛋白表達(dá)量升高。
　　 三、MCP-1直接興奮CFA炎性大鼠DRG

5、痛覺神經(jīng)元
　　 1.單細(xì)胞全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)研究結(jié)果表明，在MCP-1作用1min后能增強(qiáng)CFA炎性大鼠DRG痛覺神經(jīng)元的興奮性，表現(xiàn)為神經(jīng)元的去極化，可誘發(fā)動(dòng)作電位產(chǎn)生的閾電流閾值降低，以及相同電流刺激產(chǎn)生的動(dòng)作電位數(shù)目增加；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)MCP-1能夠增大DRG痛覺神經(jīng)元TTX-S(TTX-sensitive)鈉電流的幅度，并使TTX-S鈉電流激活曲線左移，對(duì)TTX-R(TTX-resistant)鈉電流和鉀電流沒有調(diào)節(jié)作用

6、。
　　 四、MCP-1增強(qiáng)正常大鼠脊髓后角痛覺信息傳遞
　　 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，正常大鼠鞘內(nèi)注射MCP-1可直接誘導(dǎo)產(chǎn)生疼痛行為。
　　 2.脊髓片全細(xì)胞膜片鉗記錄結(jié)果表明，MCP-1能增強(qiáng)距常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元自發(fā)興奮性突觸后電流(spontaneous EPSCs)并減弱自發(fā)抑制性突觸后電流(spontaneous IPSCs)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，MCP-1的這一作用是通過增強(qiáng)AMPA和NMDA

7、電流并抑制GABA電流實(shí)現(xiàn)的。
　　 綜上所述，我們通過研究MCP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)對(duì)CFA炎性大鼠的外周DRG痛覺神經(jīng)元和正常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元痛覺信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用，表明在炎性疼痛中，MCP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)通過增強(qiáng)外周DRG痛覺神經(jīng)元的興奮性，在疼痛的產(chǎn)生過程中發(fā)揮了重要作用；而該信號(hào)系統(tǒng)能夠通過增強(qiáng)正常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元興奮性突觸傳遞，減弱抑制性突觸傳遞，并可直接誘導(dǎo)產(chǎn)生疼痛行為，提示MCP-1/