胸段硬膜外交感神經(jīng)阻滯對(duì)大鼠腦缺血半暗帶細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、第一部分SD大鼠胸段硬膜外交感神經(jīng)阻滯模型的建立 目的：胸段硬膜外麻醉(TEA)產(chǎn)生的心臟和胃腸道交感神經(jīng)阻滯，正越來越多地用于重癥治療。本研究擬建立大鼠的胸段硬膜外交感神經(jīng)阻滯(TESB)模型，通過評(píng)估心肺功能和交感神經(jīng)興奮度確立其穩(wěn)定性。為后續(xù)工作打下基礎(chǔ)。 方法：SD大鼠30只，手術(shù)方法于T5-6間隙至入硬膜外導(dǎo)管，隨機(jī)分為三組，每組10只，對(duì)照組(CON)分別于術(shù)后第1和第3天注射生理鹽水0．2mi，硬膜外組1(

2、EPl25)注射0．25％羅哌卡因0．2ml，硬膜外組2(EPl50)注射0．5％羅哌卡因0．2ml。分別于注射后30、60、90、和120min監(jiān)測平均動(dòng)脈壓、心率、呼吸、和運(yùn)動(dòng)評(píng)分。記錄前爪、高胸段、中胸段、低胸段、后爪以及鼠尾近、遠(yuǎn)端皮膚溫度。交感神經(jīng)興奮度通過皮溫變化量(AT)體現(xiàn)。 結(jié)果：EPl25組血流動(dòng)力學(xué)和呼吸無變化，運(yùn)動(dòng)功能障礙輕微，胸段AT高于對(duì)照組(各時(shí)間點(diǎn)的高、中、低胸段P<0．01)。EPl25組尾遠(yuǎn)端

3、溫度下降。術(shù)后第三天的各組AT值測定結(jié)果與第一天相若。 結(jié)論：0．25％羅哌卡因可成功構(gòu)建大鼠TESB模型，不并發(fā)心肺功能和運(yùn)動(dòng)功能的副反應(yīng)。這一新技術(shù)可以應(yīng)用于今后的重癥治療模型。 第二部分：TESB對(duì)MCAO模型大鼠缺血／再灌注半暗帶細(xì)胞凋亡的影響目的：觀察大鼠腦缺血再灌注神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生規(guī)律，從行為學(xué)到細(xì)胞和分子水平評(píng)價(jià)TESB對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的治療效果。探討TESB抑制半暗帶細(xì)胞凋亡的機(jī)理。

4、 方法：在TESB模型大鼠基礎(chǔ)上采用線拴法制備左側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)缺血／再灌注模型。40只大鼠隨機(jī)分為3組。假手術(shù)組(SHAM)(n=8)；硬膜外組(EPI)(n=16)：缺血／再灌注前后硬膜外0．25％羅哌卡因處理；對(duì)照組(CON)(n=16)：缺血／再灌注前后硬膜外生理鹽水處理。mNNS評(píng)分法觀察缺血／再灌注2h、24h大鼠神經(jīng)功能缺失情況；TTC染色測定腦梗死容積；HE染色，光鏡下觀察損傷側(cè)腦組織的形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞儀

5、檢測細(xì)胞凋亡情況；應(yīng)用高效液相電化學(xué)方法檢測再灌注后海馬2，3一DHBA和2，5-DHBA。 結(jié)果： l、與SHAM組相比，CON組表現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)功能缺失，光鏡下腦組織損傷明顯，細(xì)胞凋亡增多，凋亡百分率上升，DHBA水平升高(P<0．01)；2、與SHAM組相比，EPI組表現(xiàn)與CON組類似；3、EPI組與CON組比較，神經(jīng)功能明顯改善，腦梗死容積減小，凋亡百分率降低，DHBA表達(dá)水平下降，(P<0．05)。 結(jié)論